[发明专利]用于培养铁皮石斛漆斑病菌的含有特异氨基酸的培养基有效
申请号: | 201510960273.5 | 申请日: | 2015-12-18 |
公开(公告)号: | CN105349440B | 公开(公告)日: | 2019-05-24 |
发明(设计)人: | 方丽;王连平;王汉荣 | 申请(专利权)人: | 浙江省农业科学院 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;C12R1/645 |
代理公司: | 杭州天昊专利代理事务所(特殊普通合伙) 33283 | 代理人: | 向庆宁 |
地址: | 310025 *** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 培养 铁皮 石斛 病菌 含有 特异 氨基酸 培养基 | ||
本发明提供一种用于培养铁皮石斛漆斑病菌的含有特异氨基酸的培养基,其中,该培养基的组成如下:氮源化合物3g,磷酸氢二钾1g,硫酸镁(MgSO4·7H2O)0.5g,氯化钾0.5g,硫酸亚铁0.01g,糖源物质30g,琼脂20g,添加水至1000mL,其中所述的糖源物质为蔗糖、葡萄糖、半乳糖、菊糖;所述的氮源化合物为L‑脯氨酸、L‑缬氨酸、L‑苯丙氨酸、L‑色氨酸或硝酸钾。使用本发明的培养基和培养方法可以大量获得该病菌的孢子。
技术领域
本发明属于微生物领域,特别的,属于采用培养方法来培养铁皮石斛漆斑病菌的培养方法。
背景技术
铁皮石斛(DendrobiumSw.)又名黑节草、云南铁皮,是兰科(Orchidaceae)多年生附生草本植物,是一种珍贵的中药材。早在《神农本草经》中就有记载,具有滋阴清热、生津益胃、润肺止咳、明目强身、镇痛消炎的功效。同时现代研究表明,石斛药材除具有本草记载的等功效外,还具有抗肿瘤、抗辐射、抗血小板凝集及增强机体免疫力等功效。近年来石斛药材的需求量不断增加,而栽培技术的不断创新使得人工种植石斛的面积不断增大,然而随着集中种植面积的增加,出现的问题也不断增多,石斛种植出现多种不同的病害,例如铁皮石斛漆斑病。叶片染病后病斑初呈淡褐色至黑褐色的小点,后扩展为1~2mm大小的圆形或椭圆形病斑,中间凹陷、灰白色,病健交界处似围绕一条淡褐色至黑褐色的边界线。叶鞘和花梗染病后常引起休眠枝干的早衰老或顶部枯死。这不仅影响石斛的品质,也影响石斛的产量,具统计漆斑病导致产量损失5%-10%。防止漆斑病的发生和扩增有助于提高石斛生产的产量和品质,确保石斛产业健康有序的发展。为了研究如何防治铁皮石斛的漆斑病,就需要首先培养漆斑病来进行一些方面的研究,例如研究该病菌的生物学特性,药效试验等筛选出合适的药物进行防治。但是,这种病菌难以培养,而且产量低,为此,需要提供如何高效率的培养漆斑病病菌进行相关方面的研究。
发明内容
为了解决以上问题,本发明提供一种培养铁皮石斛漆斑病菌的方法,该方法包括:提供荷叶煎汁培养基,其中该荷叶煎汁培养基的组成为:荷叶200g,蔗糖20g,琼脂20g,添加水至1000ml。
优选的,荷叶煎汁培养基经过如下过程进行制备:在煎锅中放入1000mL蒸馏水和200g荷叶,煮沸5min,过滤去除茎叶,加入20g蔗糖,定容至1000mL。
优选的,培养的PH值为7或8.
优选的,培养的温度为25-30摄氏度。
优选的,所述的铁皮石斛漆斑病菌为露湿漆斑菌(Myrothecium roridum Tode exFr.)。
另一方面,本发明提供荷叶煎汁培养基在制作培养铁皮石斛漆斑病菌培养基中的用途,其中所述的荷叶煎汁培养基由下列组分组成:荷叶200g,蔗糖20g,琼脂20g。
优选的,优选的,荷叶200g经过如下过程进行制备:在煎锅中放入1000mL蒸馏水和200g荷叶,煮沸5min,过滤去除茎叶,加入20g蔗糖,定容至1000mL。
优选的,培养的PH值为7或8。
优选的,培养的温度为25-30摄氏度。
优选的,所述的铁皮石斛漆斑病菌为露湿漆斑菌(Myrothecium roridum Tode exFr.)。
另一方面,本发明提供一种用于培养铁皮石斛漆斑病菌的含有特异氨基酸的培养基
该培养的组成如下:氮源化合物3g,磷酸氢二钾1g,硫酸镁(MgSO4·7H2O)0.5g,氯化钾0.5g,硫酸亚铁0.01g,糖源物质30g,琼脂20g,添加水至1000mL,其中所述的糖源物质为蔗糖、葡萄糖、半乳糖、菊糖。
优选的,糖源物质为菊糖。
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