[发明专利]抗猪流行性腹泻病毒单克隆抗体及其应用

说明书

本发明提供了特异性结合猪流行性腹泻病毒的鼠单克隆抗体的可变区序列、其制备的抗体或抗体片段，以及使用该抗体制备的疫苗和试剂盒。本发明的药物组合物能有效预防和治疗猪流行性腹泻病毒感染。本发明的试剂盒能有效检测猪流行性腹泻病毒，灵敏度高，检测快速。

技术领域

本发明涉及抗猪流行性腹泻病毒单克隆抗体，以及使用该单克隆抗体制备的药物组合物、试剂盒等应用，属于生物医药领域。

背景技术

猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的一种肠道传染病，主要引起哺乳仔猪呕吐、水样腹泻、脱水等症状，严重时可造成仔猪的死亡，死亡率能达到50％-100％。近年，自2010年冬季，在我国的大部分地区爆发流行，之后相继在韩国、日本、台湾等地区也大范围爆发此病。2013年上半年在北美地区也爆发此病，并迅速传播，给全球的养殖业造成了严重的损失。

目前，检测猪流行性腹泻病毒的方法包括病毒分离鉴定和血清检查，但耗时过长；PCR方法虽然灵敏，但需昂贵的仪器和专业的操作人员。因而，现有技术中亟需研制一种简单、快速、准确检测猪流行性腹泻病毒的产品。

发明内容

为了解决现有技术的不足，本发明提供了两个抗猪流行性腹泻病毒单克隆抗体，以及含单克隆抗体的试剂盒、药物组合物及其应用。

本发明涉及一种特异性结合猪流行性腹泻病毒的鼠单克隆抗体PEDV-McAB1的可变区序列，其中，1)重链可变区氨基酸序列为SEQ ID No.2所示的氨基酸序列或该序列经过一个或多个氨基酸添加、删除、替换或修饰保守性突变获得的保守性变异体；2)轻链可变区氨基酸序列为SEQ ID No.4所示的氨基酸序列或该序列经过一个或多个氨基酸添加、删除、替换或修饰保守性突变获得的保守性变异体。

本发明还涉及具有上述可变区序列的抗体或其片段，所述抗体或其片段仍保持特异性结合猪流行性腹泻病毒的能力。

本发明还涉及一种特异性结合猪流行性腹泻病毒的鼠单克隆抗体PEDV-McAB2的可变区序列，其中，1)重链可变区氨基酸序列为SEQ ID No.6所示的氨基酸序列或该序列经过一个或多个氨基酸添加、删除、替换或修饰保守性突变获得的保守性变异体；2)轻链可变区氨基酸序列为SEQ ID No.8所示的氨基酸序列或该序列经过一个或多个氨基酸添加、删除、替换或修饰保守性突变获得的保守性变异体。

本发明还涉及具有上述可变区序列的抗体或其片段，所述抗体或其片段仍保持特异性结合猪流行性腹泻病毒的能力。

本发明还涉及一种药物组合物，其中，所述药物组合物包含免疫量的含有所述的鼠单克隆抗体PEDV-McAB2的可变区序列的抗体或所述抗体的片段，以及药学上可接受的载体。

本发明还涉及所述药物组合物在制备预防和/或治疗猪流行性腹泻病毒感染相关疾病的药物中的应用。

本发明还涉及一种试剂盒，其中，所述试剂盒包括有效量的具有鼠单克隆抗体PEDV-McAB1的可变区序列的抗体或所述抗体的片段，和/或有效量的具有鼠单克隆抗体PEDV-McAB2的可变区序列的所述的抗体或所述抗体的片段，以及用于对猪流行性腹泻病毒进行抗原抗体反应进行检测的检测试剂、阴性对照、阳性对照。

本发明还涉及一种试剂盒，其中，所述试剂盒包括有效量的具有鼠单克隆抗体PEDV-McAB1的可变区序列的抗体或所述抗体的片段，和/或有效量的具有鼠单克隆抗体PEDV-McAB2的可变区序列的抗体或所述抗体的片段，以及用于对猪流行性腹泻病毒进行抗原抗体反应进行检测的检测试剂、阴性对照、阳性对照，其中，所述用于对猪流行性腹泻病毒进行抗原抗体反应进行检测的检测试剂为与所述抗体或所述抗体的片段结合的酶标二抗以及与所述标记的酶产生颜色反应的底物，所述酶标二抗包括酶标羊抗鼠多抗、酶标羊抗鼠二抗。