[发明专利]一种壳聚糖复合N-二苯亚甲基-氨基-甘氨酸苄酯抗凝血材料的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种壳聚糖复合N-二苯亚甲基-氨基-甘氨酸苄酯抗凝血材料的制备方法，属于抗凝血材料制备领域。

背景技术

在人体正常的循环系统中，它是生理性止血的重要环节。但是在血管壁受损、

血液成分改变或血流异常时，会引发凝血，而导致血栓形成。血栓形成已被证实

是引起心肌梗死和中风等各类心、脑血管疾病死亡的主要原因。除了人体循环系统中发生的凝血反应外，随着科学技术的进步，不断产生新型的能够替换病理性人体器官的人造器官，这些人工器官在安装手术过程中引发的凝血反应是导致手术失败的主要原因。因此，为了预防血栓形成，开发能够阻止血液凝固的抗凝制剂已成为药物研发的重要任务。

肝素是目前临床上抗凝血效果最好的抗凝剂之一，它能与很多凝血因子，如凝血因子、凝血酶原、凝血酶等，形成稳定的复合物，该复合物能够抑制凝血因子的活性，从而具有良好的抗凝血功能。但由于长链肝素分子特异识别性低，能与凝血因子以外的蛋白质相结合，长期服用，可能诱发高血钾或出血症等副作用；而且肝素不能人工合成，价格非常昂贵。壳聚糖具有类肝素的结构，而且羧基是抗凝血作用中的重要基团，我国具有丰富壳聚糖和氨基酸，它们都具有优良的生物相容性和可降解性，所以通过对壳聚糖进行改性和优化，可以有效地代替肝素的作用，所以制备一种有效的壳聚糖复合抗凝血材料很有必要。

发明内容

本发明所要解决的技术问题：针对目前壳聚糖制备抗凝血材料时在血液中浓度较低，对其硫酸酯化和羧甲基化时污染环境且与人体相容性较差的问题，提供了一种通过将氨基酸改性制备N-二苯亚甲基-氨基-甘氨酸苄酯，随后对壳聚糖进行脱乙酰处理复合改性制备壳聚糖复合N-二苯亚甲基-氨基-甘氨酸苄酯抗凝血材料，可以提高人体系统相容性，有效的对抗凝血进行进行提高。

为解决上述技术问题，本发明采用如下所述的技术方案是：

（1）按重量份数计，选取20～35份的甘氨酸苄酯对甲苯磺酸盐、20～25份的二苯亚甲胺和45～55份的二氯甲烷，在20～30℃下，按600～800r/min的转速搅拌混合20～24h；

（2）待其混合搅拌完成后，对其抽滤并收集滤液，随后对其旋转蒸发至干，收集结晶，随后按乙醚和结晶体质量比5:1，将结晶溶解至乙醚中，并用去离子水和质量浓度为26.5%的盐水分别洗涤3～5次，待洗涤完成后，用无水硫酸钠干燥10～12h，待干燥完成后，对其减压抽滤，并收集滤液，使其减压浓缩重结晶制备得N-二苯亚甲基-氨基-甘氨酸苄酯，备用；

（3）选取100mL的质量分数为40%的氢氧化钠溶液置于250mL的烧杯中，并将烧杯置于60～80℃恒温水浴下加热10～15min，随后添加10～15g壳聚糖于烧杯中，在600～800r/min下搅拌反应2～3h；

（4）待反应完成后，对其抽滤并收集滤饼，随后用去离子水洗涤至pH为7.0，在60～80℃烘箱中干燥6～8h，制备得干燥脱乙酰壳聚糖，随后按固液质量比1:10，将脱乙酰壳聚糖与异丙醇在烧杯中搅拌混合，使其充分溶胀2～3h，随后继续添加总质量20～30%的质量浓度为40%的氢氧化钠溶液于烧杯中，在-12～-10℃下搅拌混合20～24h，制备得改性壳聚糖备用；

（5）按重量份数计，选取65～85份的蒸馏水、7～17份的N-二苯亚甲基-氨基-甘氨酸苄酯和8～18份的环氧氯丙烷置于三口烧瓶中，在20～30℃下，用质量浓度为40%的氢氧化钠溶液调节pH至9.0～9.2；

（6）随后将其置于50～60℃下水浴加热，使其回流反应并每隔0.5h滴加1～2mL的环氧氯丙烷，待反应溶液完全澄清即可停止滴加，待滴加完成后，继续加热反应2～3h，制备得N-二苯亚甲基-氨基-甘氨酸苄酯改性中间体溶液；

（7）按去离子水和改性壳聚糖质量比为10:1，将改性壳聚糖添加至去离子水中搅拌混合，制备得壳聚糖溶液，随后在50～60℃水浴加热下，将壳聚糖溶液滴加至N-二苯亚甲基-氨基-甘氨酸苄酯改性中间体溶液中，滴加速度为1mL/min，滴加时间为25～30min，待滴加完成后，对其抽滤并收集滤渣，用去离子水洗涤至pH为7.0，并置于60～80℃烘箱中干燥6～8h，即可制备得一种壳聚糖复合N-二苯亚甲基-氨基-甘氨酸苄酯抗凝血材料。