[发明专利]一种基于液体培养基的白芨种苗生产方法

权利要求书

1.一种基于液体培养基的白芨种苗生产方法，其特征在于：包括如下步骤：

a、灭菌：将开花授粉15～20周龄的白芨蒴果用自来水流水冲洗30min以上，进行表面灭菌，然后剥开，对种子进行消毒；对种子进行消毒的操作如下：将种子抖落到无菌容器中，加5％次氯酸钠溶液完全浸泡种子20分钟；用灭菌的50目细胞筛过滤种子；再用无菌水冲洗、过滤，反复4～6次，冲去表面残留的消毒液；细胞筛过滤，得到消毒后的种子；所述的次氯酸钠溶液中滴加1～2滴吐温20；

b、萌发：消毒后的种子置于MS+0.5～2.0mg/L TDZ+30g/L白砂糖、pH5.8的液体培养基中，23～27℃，90～120rpm黑暗培养15～20天后，转入光照16h/暗培养8h的光周期下震荡培养15～20天，种子萌发；

c、生长成芽：将已萌发的种子接种于MS+0.1～0.5mg/L 6-BA(6-苄氨基腺嘌呤)+30g/L白砂糖+6g/L琼脂、pH5.8的固体培养基上，25℃，16/8h光周期培养；培养20～30天，即得到幼苗；

d、生根培养：幼苗接种到1/2MS+0.1～1.0mg/L NAA(萘乙酸)+30g/L白砂糖+0.5～2g/L活性炭+6g/L琼脂、pH5.8的培养基上，25℃，16/8h光周期培养；30～40天后得到成苗，

e、将成苗进行炼苗，移栽。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤a中白芨蒴果表面灭菌采用75％乙醇进行表面消毒30s，无菌水冲洗1～2次。

3.如权利要求1～2任一项所述的方法，其特征在于：步骤b培养基中添加1.0mg/LTDZ。

4.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于：步骤b中25℃、100rpm暗培养。

5.如权利要3所述的方法，其特征在于：步骤b中25℃、100rpm暗培养。

6.如权利要求1或2所 述的方法，其特征在于：步骤c培养基中添加0.2mg/L6-BA。

7.如权利要求3所述的方法，其特征在于：步骤c培养基中添加0.2mg/L6-BA。

8.如权利要求4所述的方法，其特征在于：步骤c培养基中添加0.2mg/L6-BA。

9.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于：步骤d中培养基中添加0.1～0.5mg/LNAA和2g/L活性炭。

10.如权利要求3所述的方法，其特征在于：步骤d中培养基中添加0.1～0.5mg/LNAA和2g/L活性炭。

11.如权利要求4所述的方法，其特征在于：步骤d中培养基中添加0.1～0.5mg/LNAA和2g/L活性炭。

12.如权利要求6所述的方法，其特征在于：步骤d中培养基中添加0.1～0.5mg/LNAA和2g/L活性炭。

13.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于：步骤e所述炼苗的操作如下：当幼苗的根生长到3～5cm长时，逐渐揭开瓶盖适应3～5天。

14.如权利要求3所述的方法，其特征在于：步骤e所述炼苗的操作如下：当幼苗的根生长到3～5cm长时，逐渐揭开瓶盖适应3～5天。

15.如权利要求4所述的方法，其特征在于：步骤e所述炼苗的操作如下：当幼苗的根生长到3～5cm长时，逐渐揭开瓶盖适应3～5天。

16.如权利要求6所述的方法，其特征在于：步骤e所述炼苗的操作如下：当幼苗的根生长到3～5cm长时，逐渐揭开瓶盖适应3～5天。