[发明专利]一种依诺肝素钠的纯化方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种生物药用原料的制备方法，属于生物技术领域，具体是一种依诺肝素钠纯化方法。

背景技术

依诺肝素钠(EnoxaparinSodium)属于低分子肝素，主要特征为分子中有一个4一烯吡喃糖醛酸结构。本品抗血栓作用强、出血危险性小，是目前抗凝血、抗血栓形成的主要治疗药物之一，2006年的全球销售额达24.3ML欧元。法国Aventis公司曾研发，并于1993年申请过制备工艺的专利。但该专利未涉及生产过程中酯化率、成环率　及产物纯化等关键工艺。

以猪黏膜肝素为起始原料，经肝素季铵盐制备、肝素苄酯制备、对肝素苄酯进行碱解聚，以酸中和、醇沉淀，精制、脱色，脱水干燥，得到依诺肝素钠成品。其中，在酸中和、醇沉淀后得到的依诺肝素钠中间体，其澄清度往往很差，如果不加以精制纯化，就无法达到药典中澄清度的要求。

由于依诺肝素钠广阔的市场前景和现有纯化技术存在诸多弊端，开发一种能够适合工业生产使用的、快速简便的纯化依诺肝素钠的方法就成为了亟待解决的问题。

发明内容

本发明的目的是提供一种工艺操作简单，安全可控，收率高纯化依诺肝素钠的方法。

一种纯化依诺肝素钠的纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）将依诺肝素钠粗品，放入氯化钠溶液中溶解，得到依诺肝素钠粗品溶液，过滤；

（2）将步骤（1）所得滤液经离心分离，得上清液和沉淀物；

（3）将乙醇或甲醇加入到步骤（2）中获得的上清液中，搅拌并静置后得到沉淀物；

（4）将沉淀物用纯化水溶解成10wt~15wt%的溶液，用0.22μm滤膜过滤后，喷雾干燥得依诺肝素钠成品。

步骤（1）中氯化钠溶液的浓度为4-10%，依诺肝素钠粗品与氯化钠溶液的重量与体积比为1:6-12。

步骤（2）中离心分离的转速为1000~5000r/min。

步骤（3）中乙醇或甲醇与上清液的体积比为2-6:1，搅拌时间为2~4h，静置时间为5-12h。

研究发现，影响依诺肝素钠澄清度的杂质主要来源于肝素钠中的大分子蛋白和小分子的寡糖，这些杂质在依诺肝素钠的制备过程中，其分子中的醛基经“美拉德反应”会产生有色物质。本发明先采用高速低温离心除去了大分子的蛋白，再通过醇沉法除去寡糖等小分子杂质，从而达到了纯化依诺肝素钠的目的。

与现有纯化方法相比，本发明所述方法收率可达90%以上，且产品澄清度好，纯化操作简便，非常适合制药工业生产。

具体实施方式

以下结合具体实施例对本发明作进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

实施例

将制备得到的依诺肝素钠粗品1.1kg放入5L10%的氯化钠溶液中搅拌溶解，得到依诺肝素钠粗品溶液，过滤得到滤液。将滤液在3000r/min的离心机中30min，得上清液和沉淀物。将10L乙醇加入到上清液中，搅拌1h后静置3h，得沉淀物。将沉淀物用纯化水溶解成10wt~15wt%的溶液，用0.22μm滤膜过滤后，喷雾干燥得依诺肝素钠成品1.02kg，纯化收率93.5%。

以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非是对本发明作其它形式的限制，任何熟悉本专业的技术人员可能利用上述揭示的技术内容加以变更或改型为等同变化的等效实施例。但是凡是未脱离本发明技术方案内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与改型，仍属于本发明技术方案的保护范围。