[发明专利]陆地棉转化事件ICR201501及其特异性鉴定方法

说明书

本发明公开了陆地棉转化事件ICR201501及其特异性鉴定方法。转基因棉花ICR201501为将序列表中序列1所示的外源DNA分子插入陆地棉CCRI24基因组第A05号染色体的第8415359‑8415371位间，替换掉第A05号染色体的第8415359‑8415371位间11bp的碱基序列，得到的棉花。通过试验证明：转基因棉花ICR201501不仅纤维长度、马克隆值、比强度和整齐度高于受体材料，而且株高、叶片长度、叶片宽度、叶柄长度、叶柄宽度、果枝数、单铃数、成铃数和衣分等方面也均高于受体材料，为培育具有优良纤维品质的转基因棉花的研究奠定基础。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及陆地棉转化事件ICR201501及其特异性鉴定方法。

背景技术

转化事件是由外源基因在基因组插入位点的上下游侧翼区和外源基因构成的分子结构。通常，外源基因转化植物可以得到一个转化体群体，这个转化体群体包含大量独立的事件，其中每个事件都是独特的。外源基因在植物中的表达受到外源基因所插入的染色体位置的影响。这可能源自染色质结构或者整合位点附近转录调控元件的影响。相同基因在不同转化事件中的表达水平具有很大的差异，在表达的空间或时间模式上也可能存在差异。而且外源基因的插入也可能会影响内源基因的表达。因此，每个独立转化事件对受体植物的影响都是不同的。获得能有效表达外源基因，同时不影响植株本身农艺性状的植物转化事件在培育转基因作物新品种中具有重要的应用价值。

棉花作为天然可再生纤维原料，在纺织工业中发挥着重要，优质纤维是纺织工业所期望的。可将转基因技术的方法用于棉花以产生具有纤维改良性状。例如可通过表达能够使纤维细胞伸长的转基因在转基因棉花中获得长纤维棉。转基因在棉花中的表达可受多个因素影响，例如T-DNA插入区中所使用的调控元件、转基因在染色体上的插入位点及接近整合位置的任何内源调控元件的相似性的组合都会影响转基因的表达。例如，采用相同的转化方法获得的相似的转化事件之间的基因表达水平呈现出差异性，转化事件表现出差异性。因此，必须获得足够量的转化事件，并进行田间筛选以获得生产上有价值的转化事件。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种转基因棉花的培育方法。

本发明提供的转基因棉花的培育方法为将外源DNA片段插入目的棉花基因组第A05号染色体的第8415359-8415371位间，替换掉第A05号染色体的第8415359-8415371位间11bp的碱基序列，得到转基因棉花；

所述转基因棉花的纤维品质高于所述目的棉花；

所述外源DNA片段为含有GhKCS6基因的DNA分子。

上述方法中，

所述外源DNA片段的核苷酸序列为序列表中序列1；

所述外源DNA片段在所述转基因棉花的上游侧翼片段为所述目的棉花基因组第A05号染色体的自第8415359位核苷酸起向其上游方向延伸得到的长度为0至5Kb的任意一个DNA片段；

所述外源DNA片段在所述转基因棉花的下游侧翼片段为所述目的棉花基因组第A05号染色体的自第8415371位核苷酸起向其下游方向延伸得到的长度为0至5Kb的任意一个DNA片段。

上述方法中，

所述上游侧翼片段为序列表中序列2所示的核苷酸；

所述下游侧翼片段为序列表中序列3所示的核苷酸；

所述转基因棉花的纤维品质高于所述目的棉花体现在如下B1)-B12)：

B1)转基因棉花纤维的长度高于所述目的棉花；

B2)转基因棉花纤维的马克隆值高于所述目的棉花；

B3)转基因棉花纤维的比强度高于所述目的棉花；