[发明专利]一种幽门螺杆菌的检验方法

说明书

技术领域

本发明属于医学技术领域，涉及一种幽门螺杆菌的检验方法。

背景技术

幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)简称Hp，是一种单极、多鞭毛、末端钝圆、螺旋形弯曲的细菌。1983年首次从慢性活动性胃炎患者的胃黏膜活检组织中分离成功，是目前所知能够在人胃中生存的一种微生物种类。幽门螺杆菌病的不良预后是胃癌。胃癌是全球最常见的恶性肿瘤之一，在癌症死亡原因中位列第二。在我国，每年大约有16万人死于胃癌。

预防和控制胃癌已日益引起人们的关注。研究指出，幽门螺杆菌生存于人体胃幽门部位，是最常见的细菌病原体之一。世界有多半人口受到过幽门螺杆菌的感染，而在有些国家几乎90％的人都感染过这种细菌。人们通常是在幼年时就受到感染，5岁以下达到50％。这种细菌感染首先引起慢性胃炎，并导致胃溃疡和胃萎缩，严重者则发展为胃癌。据统计，初次感染幽门螺杆菌年龄较早的人群萎缩性胃炎及胃癌发生率高，幽门螺杆菌感染与胃癌死亡率的高低呈现平行关系。幽门螺杆菌寄生在胃黏膜组织中，67％～80％的胃溃疡和95％的十二指肠溃疡是由幽门螺杆菌引起的。慢性胃炎和消化道溃疡患者的普遍症状为：食后上腹部饱胀、不适或疼痛，常伴有其他不良症状，如暖气、腹胀、反酸和食欲减退等。有些患者还可出现反复发作性剧烈腹痛、上消化道少量出血等。据此，专家们认为，及早发现幽门螺杆菌感染者，及时而有效地用抗菌素杀灭幽门螺杆菌，对预防和控制胃癌有重大意义。

目前检测HP的方法，临床上较为常用的主要为病理组织切片嗜银染色法，该方法操作较为繁琐，技术要求相对较高，不适合推广应用。

发明内容

本发明的目的在于克服上述技术存在的缺陷，提供一种操作简便、成本低廉、准确率高的幽门螺杆菌的检验方法。

其具体技术方案为：

一种幽门螺杆菌的检验方法，包括以下步骤：取黏膜组织置于布氏培养基中，并用接种环划线；将布氏培养基放入培养缸内，并在培养缸内充入N₂、O₂、CO₂的混合气体，然后放 入37℃恒温箱内，经过3-5d，观察菌落形态，对细菌进行鉴定，滴1滴生理盐水在干净载玻片上，用接种环刮取菌落放到生理盐水中涂开，待涂片烤干后进行革兰染色，在显微镜下观察，典型的涂片染色镜检呈海鸥状、S状弯曲菌或短杆菌，见到球形体或长丝体形态变异，均为革兰染色阴性；用接种环刮取一环细菌置于尿素酶试纸条上，放置37℃温箱1mm后观察结果，试剂变成红色或者紫红色为阳性结果。

优选地，所述布氏培养基的制备方法包括以下步骤：布氏选择血平板的制备：称取胰胨8g、蛋白胨8g、葡萄糖0.5g、酵母提取物1.5g、NaCl 3g、偏重亚硫酸钠0.1g、琼脂粉10g，加双蒸水至500mL，高压蒸汽灭菌，冷却至50℃，加入脱纤维绵羊血30mL、TMP(甲氧苄啶)抗生素混合液2mL，混合后倒入无菌培养皿中，待完全凝固，冰箱4℃保存。

进一步优选，所述TMP抗生素混合液的制备方法包括以下步骤：TMP50mg、无菌双蒸水50mL和10滴乳酸，隔水煮沸10min，再加入万古霉素80mg和多粘菌素B2mg，混合均匀。

优选地，所述混合气体中各个组分的体积百分含量为：N₂85％、O₂5％、CO₂10％。

与现有技术相比，本发明的有益效果为：

本发明的检验方法具有操作简便、成本低廉、准确率高的特点，适合推广应用。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明的技术方案作进一步详细地说明。

一种幽门螺杆菌的检验方法，包括以下步骤：取黏膜组织置于布氏培养基中，并用接种环划线；将布氏培养基放入培养缸内，并在培养缸内充入N₂、O₂、CO₂的混合气体，所述混合气体中各个组分的体积百分含量为：N₂85％、O₂5％、CO₂10％。然后放入37℃恒温箱内，经过3d，观察菌落形态，对细菌进行鉴定，滴1滴生理盐水在干净载玻片上，用接种环刮取菌落放到生理盐水中涂开，待涂片烤干后进行革兰染色，在显微镜下观察，典型的涂片染色镜检呈海鸥状、S状弯曲菌或短杆菌，见到球形体或长丝体形态变异，均为革兰染色阴性；用接种环刮取一环细菌置于尿素酶试纸条上，放置37℃温箱1mm后观察结果，试剂变成红色或者紫红色为阳性结果。