[发明专利]一种被可注射水凝胶包裹的生长因子多孔微球复合系统

权利要求书

1.一种被可注射水凝胶包裹的生长因子多孔微球复合系统的制备，其特征在于：其包括以透明质酸与己二酸二酰肼交联得到的HA-ADH溶胶作第一组分，和负载在第一组分中的载有生长因子的聚乳酸多孔微球。

2.根据权利要求1所述的被可注射水凝胶包裹的生长因子多孔微球复合系统的制备，其特征在于：所述的生长因子为神经生长因子NGF和碱性成纤维生长因子bFGF，其质量比为8.5-11.5：1；所述载有生长因子的聚乳酸多孔微球中生长因子的质量百分比为4wt％-12.5wt％。

3.根据权利要求1所述的被可注射水凝胶包裹的生长因子多孔微球复合系统的制备，其特征在于：HA-ADH溶胶与载有生长因子的聚乳酸多孔微球的质量比为1：1.25-5.75。

4.根据权利要求1所述的被可注射水凝胶包裹的生长因子多孔微球复合系统的制备，其特征在于：所述的HA-ADH溶胶是将透明质酸与己二酸二酰肼在酸性条件以及EDC/NHS活化剂的活化作用下0-4℃反应得到的；所述的透明质酸与己二酸二酰肼的质量比为1：2-6，所述的酸性条件为pH为4.5-5.75。

5.根据权利要求1所述的被可注射水凝胶包裹的生长因子多孔微球复合系统的制备，其特征在于：所述载有生长因子的聚乳酸多孔微球的平均直径为2±1μm。

6.根据权利要求1所述的被可注射水凝胶包裹的生长因子多孔微球复合系统的制备，其特征在于：所述的载有生长因子的聚乳酸多孔微球是以添加有致孔剂和乳化剂的含有生长因子的溶液为内水相，以PLLA为油相，以含有乳化剂的溶液为外水相，使用W/O/W复乳法得到复乳，然后搅拌均匀，静置固化，离心收集沉淀，洗涤，冻干获得。

7.权利要求1所述的被可注射水凝胶包裹的生长因子多孔微球复合系统的制备方法，其特征在于：步骤如下：

(1)将透明质酸与己二酸二酰肼在酸性条件下以及EDC/NHS活化剂的活化作用下0-4℃反应得到HA-ADH溶胶；

(2)以添加有致孔剂和乳化剂的含有NGF和bFGF组分的溶液为内水相，以聚乳酸为油相，以含有PVA的溶液为外水相，使用W/O/W复乳法得到复乳，然后搅拌均匀，静置固化，离心收集沉淀，洗涤，冻干获得负载生长因子的聚乳酸多孔微球；

(3)将上述步骤得到的HA-ADH溶胶与负载生长因子的聚乳酸多孔微球搅拌均匀即可。

8.权利要求1所述的被可注射水凝胶包裹的生长因子多孔微球复合系统的制备方法，其特征在于：所述的W/O/W复乳法为：将PLLA溶于二氯甲烷中，得到油相，然后加入到添加有致孔剂和乳化剂的含有生长因子的水相中，在搅拌或超声的条件下形成W/O/W型乳液，然后再向其中加入含有乳化剂的外水相，高速搅拌成复乳；

所述步骤(2)中生长因子的包封率为55-65wt％。

9.权利要求1所述的被可注射水凝胶包裹的生长因子多孔微球复合系统的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)的反应时间为反应18-24h；

步骤(2)中所述的冻干时间为24-48h，固化时间为80-120min；

步骤(3)搅拌温度为0-4℃；

步骤(2)水相中聚乳酸与致孔剂的用量比为1：0.67-0.89，聚乳酸与乳化剂的用量比为1：1-1.33，外水相中聚乳酸与乳化剂的用量比为1：0.53-0.71。

10.权利要求1所述的被可注射水凝胶包裹的生长因子多孔微球复合系统的制备方法，其特征在于：所述步骤(2)致孔剂为碳酸钠；乳化剂为聚乙烯醇，PVA相对数均分子量为35000-50000。