[发明专利]一种精准快速无创式大鼠滴注方法

说明书

技术领域

本发明涉及临床医学和动物实验领域，具体地说，涉及一种精准快速无创式大鼠滴注方法。

背景技术

呼吸道暴露是临床医学、毒理学、环境医学等领域研究中最为重要的暴露途径之一，随着近年各学科研究的飞速发展，经呼吸道给药、染毒、呼吸监测的动物实验的需求呈上升趋势，大鼠是国际通用的标准化的实验动物，在多种医学、生物学试验研究中广泛应用，在大鼠开胸手术需呼吸机辅助呼吸、呼吸功能检测或气管内给药等动物实验中，顺利的大鼠气管插管是实验成败的前提，目前，常用的插管方法有:颈部切口插管法(邱永明，田鑫，大鼠简易的气管插管方法[J].上海第二医科大学学报，2001，21(6):567)，颈部切口钢丝引导插管法(陶运明，莫绪明，戚继荣等，一种新的大鼠气管插管方法[J]，中华实验外科杂志，2004，21(4)):504；WekslerB，NgB.LenertJ.Asimplifiedmethodforendotrochealintubationintherat[J].JoumalofAppliedPhysiology.1994.76(4):1823)，盲插法，内窥镜辅助插管法(ClaryEM.OHalloranEK，delaFuente.SG.etal.Videonendoscopicendortachealintubationoftherat[J].LabAnim，2004.38(2):158)，经口明视插管法和经颈部透照气管插管法(王响英，吴淑燕，李苏安，等，大鼠直视气管插管方法[J].上海实验动物科学，2004，24(2):107)等。

可将气管滴注法分为暴露式和非暴露式两种，暴露式即通过手术将大鼠气管暴露出来，切口再进行插管；非暴露式主要不需要暴露气管，主要是通过口腔借助透射镜、喉镜等辅助工具，利用冷光源找到气管，再用导管插入气管进行滴注。以往的暴露式气管滴注需要切开大鼠颈部的皮肤和肌肉以暴露气管，再把微样进样器插入气管，故实验的精确性得到了保证，但是尖头的微样进样器容易引起大鼠呼吸道损伤，气管切开后插管虽快速简便，但对动物机体伤害比较大。组织损伤及术后的感染都会影响术后大鼠机体的恢复，增加了非实验因素对实验结果的影响。非暴露式气管滴注是采用磨钝的静脉留置针或穿刺针进行插管，虽然具有无创性的优点，但因为这些插管针往往和普通注射器匹配，而普通注射器的精确度却不如微样进样器，且非暴露式气管滴注方法难以兼顾无创性和精确性。研究显示，鼻腔滴注可以达到呼吸道给药或染毒的目的，但尚没有相关的研究对其进行评价。

近年来，呼吸机辅助通气技术开始应用于啮齿类动物，为心胸外科、麻醉科、药学等专业的动物模型研究提供了呼吸支持手段。快速而有效的气管插管是应用辅助通气技术的前提，以往的暴露式气管滴注需要切开大鼠颈部的皮肤和肌肉以暴露气管，再将微样进样器插入气管，故实验的精确性得到了保证，但是尖头的微样进样器容易引起大鼠呼吸道损伤，气管切开后插管虽快速简便，但对动物机体伤害比较大。组织损伤及术后的感染都会影响术后大鼠机体的恢复，增加了非实验因素对实验结果的影响。非暴露式气管滴注是采用磨钝的静脉留置针或穿刺针进行插管，虽然具有无创性的优点，但因为这些插管针往往和普通注射器匹配，而普通注射器的精确度却不如微样进样器。因此，有创的插管方法会对气管及咽喉部周围组织造成损伤，从而影响插管的重复进行，进而影响整个实验的结果；而采用直视下导引钢丝引导插管(VLGIT)法，虽然为无创式气管滴注，但是滴注操作，每只动物所用时间长；滴注量尚不精确，并且插管操作同样会增加小鼠的痛苦与不适。

发明内容

本发明鉴于现有的气管滴注法中存在的缺陷和不足，为保证大鼠滴注能达到快速、精准、无创和成活率高等效果，从气管滴注的设备、麻醉、操作步骤等方面入手进行革新完善，提供一种精准快速无创的大鼠滴注方法。

为了实现本发明目的，本发明的一种精准快速无创式大鼠滴注方法，所述方法是在大鼠用乙醚麻醉后，将其悬挂在铁架台上，用包缠纱布的镊子将大鼠舌头夹住拉出口腔之外，在喉镜照射下找到声门，然后捏住大鼠鼻子，使大鼠用嘴呼吸，随着声门开合，将已吸好滴注药物的移液枪快速插入声门，将药物滴注至气管；退出移液枪，继续捏鼻3-8s，使其通过呼吸自动将滴注药物吸入肺部，待听到湿啰音，表明滴注成功。

滴注结束后，将大鼠继续悬挂在铁架台上5-10s，保持身体自然垂落，缓慢转动大鼠，使药物均匀分布到大鼠肺部。

前述的方法，将大鼠置于带盖的麻醉罐(例如玻璃罐或透明塑料罐)中进行麻醉，麻醉罐中放有蘸满乙醚的棉花或纱布。

前述的方法，待大鼠用乙醚麻醉后，用细绳系住大鼠门牙，将其悬挂在铁架台上。