[发明专利]一种中和促细胞程序性坏死抗体的蛋白及其应用

说明书

本发明公开了一种中和促细胞程序性坏死抗体的蛋白及其应用。本发明提供了一种衍生自野生型TNFα的抑制细胞坏死的多肽，所述多肽包含10‑200个氨基酸残基和序列QLVVPSE。本发明还提供包含所述多肽的药物组合物。本发明的多肽及其药物组合物能够抑制细胞坏死，进而治疗炎性疾病。

技术领域

本发明涉及生物医药领域；具体地说，本发明涉及一种能够中和促细胞程序性坏死抗体的蛋白及其在炎症治疗中的应用。

背景技术

肿瘤坏死因子α(TNF)是由各种细胞，主要是巨噬细胞和T细胞分泌的多功能细胞因子。TNF通过TNF受体1和2(TNFR1和TNFR2)行使多种生物学功能(1-3)。

许多TNF功能主要涉及三种胞内事件：1)刺激转录因子核因子kappa B(NF-κB)，从而导致细胞激活和细胞因子产生；2)诱导细胞凋亡的外部途径；和3)诱导坏死。这些活性的胞内信号传导途径共有一些组分但导致不同的结果：NF-κB激活导致促炎细胞因子分泌和细胞存活及激活；凋亡是细胞死亡的状态，特征在于胱冬酶-3激活、核断裂、在早期含有完整的细胞膜、炎性反应很少或没有；然而，坏死是细胞死亡的另一机制，其中没有胱冬酶-3的激活，细胞膜的完整性受损。坏死导致刺激强烈免疫和炎性反应的胞内物质释放(4,5)。在凋亡条件下，抑制胱冬酶可导致一种程序性细胞死亡形式，其发生时具备坏死的特征，称为“程序性坏死”(6-11)。由于此类程序性坏死是炎性过程，因此在临床上可能与诸如类风湿性关节炎、克罗恩病和银屑病等疾病相关。然而，迄今为止，尚未鉴定到触发这些疾病中程序性坏死的因子。

通过直接靶向TNF分子(单克隆抗体)或用作假受体的拮抗剂来中和TNF使得炎性疾病的治疗得到根本性变革(12)，但完全阻断TNF功能可能导致威胁生命的副作用，例如感染和肿瘤(13)。TNF在很多炎症性疾病(例如风湿性关节炎、炎性肠炎、牛皮癣等等)中都起很重要的病理作用。临床上用抗TNF治疗炎症性疾病非常有效。抗TNF的生物制剂包括：能够中和TNF的抗TNF的单克隆抗体，游离的TNF受体等等。抗TNF制剂的市场是每年150亿美元。

虽然有以上成果，但炎性疾病中细胞和组织破坏的机制仍未知：诱导NF-κB是促生存的，不直接导致细胞死亡-实际上，发现NF-κB信号在炎性肠病中阻止 凋亡(14)。据信，凋亡是抑制炎症的(15)。程序性坏死可能是炎症和细胞/组织破坏的可能机制，但缺乏人临床相关性的证据。例如，在非病毒炎性致病机理中，不知道靶细胞外的何种因子触发程序性坏死(14,16)。显然，鉴定这些因子为诊断和治疗许多炎性疾病提供了生物标志物。

在脓毒症病人中，TNF显著升高并且与病情严重程度呈正相关。然而传统的TNF阻断型抗体和游离的受体均不能有效治疗脓毒症，暗示有其他因素或因子在致病过程中协同TNF起关键作用。

因此，本领域急需调控、甚至逆转细胞坏死的物质手段，从而能治疗炎性疾病。

发明内容

本发明的目的在于提供调控、甚至逆转细胞坏死的物质手段，从而能治疗炎性疾病。

在第一方面，本发明提供一种抑制细胞坏死的多肽，所述多肽衍生自野生型TNFα，并且包含10-200个氨基酸残基和序列QLVVPSE，其中，所述多肽不结合TNFR1但与TNF竞争结合促细胞坏死抗体。

在具体的实施方式中，所述野生型TNFα是氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的人源TNFα。

在具体的实施方式中，所述促细胞坏死抗体具有：SEQ ID NO:9所示的轻链；和/或SEQ ID NO:10所示的重链。

在具体的实施方式中，所述多肽的氨基酸序列选自下组：SEQ ID NO:2-8。

在优选的实施方式中，所述多肽是可溶性多肽。

在具体的实施方式中，所述多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:2、3或4所示。