[发明专利]一种海蛇抗菌肽改造体及其原核表达制备方法和用途

权利要求书

1.一种海蛇抗菌肽Hc-C改造体，所述改造体抗菌肽氨基酸序列为：

Lys¹Phe²Phe³Lys⁴Arg⁵Leu⁶Leu⁷Lys⁸Ser⁹Val¹⁰Arg¹¹Arg¹²Ala¹³Val¹⁴Lys¹⁵Lys¹⁶Phe¹⁷。

2.根据权利要求1所述的海蛇抗菌肽Hc-C改造体，其特征为所述海蛇抗菌肽Hc-C改造体抗菌肽基因序列为：5’-aaatttttcaaaaggctgctgaagagcgtgaggcgtgcagtcaagaaattc-3’。

3.根据权利要求1所述的海蛇抗菌肽Hc-C改造体，其特征为所述改造体抗菌肽的基因序列为5’-aaattcttcaaacgtctgctgaaatccgtgcgtcgtgcggttaagaaattt-3’。

4.一种重组质粒载体，其特征为包含编码权利要求3所述的海蛇抗菌肽Hc-C改造体的核苷酸。

5.一种根据权利要求4所述的质粒载体在大肠杆菌中的表达方法，包括以下步骤：

1)扩增带有酶切位点、甲酸识别位点及终止密码子Hc-C基因序列并构建重组载体pET-32a-Hc-C；

2)重组载体转化大肠杆菌E.coli BL21(DE3)工程菌中并进行诱导表达及培养条件优化；

3)融合蛋白经过HisTrapTM FF镍柱亲和层析纯化除盐冻干；

4)甲酸切割后镍柱亲和层析收集释放的Hc-C；

5)通过凝胶过滤层析和离子交换层析纯化甲酸切割释放的Hc-C肽。

6.权利要求1-3任一所述海蛇抗菌肽Hc-C改造体在制备抗菌药物、防感染药物、防腐剂、动物饲料或化妆品添加剂中的应用。