[发明专利]一种双水相体系及其富集痕量塔格糖的应用

说明书

本发明公开了一种双水相体系及其富集痕量塔格糖的应用，包括N‑丁基吡啶四氟硼酸盐离子液体、柠檬酸铵盐和水。按质量百分比计，双水相体系中N‑丁基吡啶四氟硼酸盐离子液体为40％～50％，柠檬酸铵盐为14％～18％，其余为水，三者的质量百分比之和为100％。该方法对塔格糖的萃取率可达97.8％。具有线性范围宽，检出限低，相对标准偏差较小，对样品的测定回收率高的特点，操作简单，萃取率高，适用于酸乳中塔格糖的定量分析。

技术领域

本发明属于食品科学和分析化学的技术领域，具体涉及一种双水相体系及其富集痕量塔格糖的应用。

背景技术

D-塔格糖是近年发现的一种具有特殊功能的甜味剂,甜度与蔗糖相似,并具有低能量、改善肠道菌群、降低血糖、抗龋齿等功能，还能用作预防和治疗心脑血管疾病与代谢性疾病等慢性病的保健品和药品(成分)。D-塔格糖是D-半乳糖的酮糖异构体,自然界中极少存在,因此,D-塔格糖的大量生产通常通过生物转化或者化学转化法获得。这两种方法生产D-塔格糖的直接原料均是D-半乳糖,最终反应产物是D-塔格糖和D-半乳糖的混合物,所以D-塔格糖高效分离富集方法建立对于D-塔格搪的批量生产将具有重要意义。

鉴于塔格糖在食品和医药方面的重要功效，近年来，对塔格糖的开发利用越来越受到国家重视。然而我国在该领域的探索才刚刚起步，技术还不成熟，在分析仪器、提取方法、数据处理等方面还存在很多问题，面临着样品中塔格糖的提取率低，萃取出的产品杂质含量高，现有分析方法灵敏度不够，样品基质对塔格糖提取存在干扰，大型仪器价格昂贵，难以普及等困难。因此，建立高效、灵敏的塔格糖提取方法对于人类的生产生活是至关重要的。

酸乳中含有嗜热链球菌，在发酵过程中能够产生β-半乳糖苷酶，这种酶可以降解乳糖、半乳糖、果糖、葡萄糖等单糖，但对D-塔格糖无影响，因此能使塔格糖与其他单糖有效分离，大大减少萃取产物中的杂质，提高萃取率。

离子液体双水相作为近几年来出现的一种新型绿色分离体系，因其具有分相时间短、粘度低、萃取过程不易乳化且离子液体可以回收利用等优点而收到越来越多的关注。其中，离子液体具有不挥发、毒性小、不易燃易爆、不易氧化，以及较高的热稳定性等特征被认为是传统萃取工艺中挥发性有机溶剂的理想绿色替代品。此外，离子液体双水相两相的主要成分都是水，使得其具有生物活性分子所需要的温度和环境，在萃取分离生物物质上具有广阔的应用前景。但是到目前为止，关于离子液体双水相体系作为萃取体系分离富集生物物质的数据资料还十分缺乏，同时，关于吡啶类离子液体双水相体系用于塔格糖分离的研究还未见报道，因而对该类体系的研究探讨具有理论和现实意义。

发明内容

针对现有的塔格糖提取方法中存在的稳定性差，分离产物杂质含量大，成本高，普及困难等缺点，本发明的目的在于提供一种双水相体系及其富集痕量塔格糖的应用，可以提高塔格糖提取的纯度，缩短制备周期，同时具有操作简便，不使用大型仪器，减少使用传统有机挥发性溶剂以避免带来二次污染的特点。

为了实现上述任务，本发明采取如下的技术解决方案：

一种双水相体系，包括N-丁基吡啶四氟硼酸盐离子液体、柠檬酸铵盐和水。

具体的，按质量百分比计，双水相体系中N-丁基吡啶四氟硼酸盐离子液体为40％～50％，柠檬酸铵盐为14％～18％，其余为水，三者的质量百分比之和为100％。

优选的，按质量百分比计，双水相体系中N-丁基吡啶四氟硼酸盐离子液体为40％，柠檬酸铵盐为18％，其余为水，三者的质量百分比之和为100％。

所述的双水相体系用于富集痕量塔格糖的应用。

所述的双水相体系用于富集酸乳中痕量塔格糖的应用。

具体的富集过程包括：

步骤一：将待富集塔格糖的酸乳配制成浓度为0.04g/mL的水溶液得到待富集溶液；