[发明专利]兔特异性引物、试剂盒及其在兔源性成分鉴定中的应用有效
申请号: | 201510814626.0 | 申请日: | 2015-11-20 |
公开(公告)号: | CN105349653B | 公开(公告)日: | 2019-03-29 |
发明(设计)人: | 刘榜;王文君;吴清清;张庆德 | 申请(专利权)人: | 华中农业大学 |
主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12N15/11 |
代理公司: | 北京智为时代知识产权代理事务所(普通合伙) 11498 | 代理人: | 王加岭 |
地址: | 430070 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 特异性 引物 试剂盒 及其 兔源性 成分 鉴定 中的 应用 | ||
1.兔特异性引物,其特征在于,该引物序列如下:
OCU-F:5′-TAGCAGTAGGGATGACAGGGTTT-3′
OCU-R:5′-GCCTTAGAGTAGGGTCTTTTTGG-3′。
2.含有权利要求1所述特异性引物的检测试剂盒。
3.根据权利要求2所述的检测试剂盒,其特征在于,其还包括下述试剂中的一种或多种:Taq酶、dNTPs、MgCl2、PCR缓冲液、阳性对照DNA模板、双蒸水;或者还包括下述试剂中的一种或多种:Taq DNA MasterMix、阳性对照DNA模板、双蒸水。
4.根据权利要求3所述的检测试剂盒,其特征在于,所述阳性对照DNA模板为兔科兔属的兔基因组DNA模板,所述双蒸水为空白对照。
5.权利要求1所述的兔特异性引物或权利要求2~4任一项所述的检测试剂盒在兔源性成分鉴定中的应用。
6.兔源性成分鉴定的PCR检测方法,其步骤如下所述:
1)提取样品基因组DNA;
2)用权利要求1所述的引物进行PCR扩增,并以兔DNA模板为阳性对照,以双蒸水为空白对照;
3)对PCR扩增产物进行检测和结果判定。
7.根据权利要求6所述的PCR检测方法,其中步骤2)PCR扩增的反应体系如下:
PCR反应程序如下:
94℃预变性5min;94℃变性30s,60℃退火30s,72℃延伸13s,30次循环;4℃降温2min。
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