[发明专利]一种大樱桃砧木吉塞拉组培方法及培养基

权利要求书

1.一种大樱桃砧木吉塞拉培养基，其特征在于，该大樱桃砧木吉塞拉培养基采用大樱桃砧木吉塞拉6号培养基；包括诱导培养基、增殖培养基和生根培养基；

所述诱导培养基包括：1L培养基中含有MS基础培养基各工作液原料、6-苄氨基嘌呤1.0mg/L、吲哚丁酸0.1mg/L、蔗糖30000mg/L、琼脂10000-15000mg/L；

所述增殖培养基包括：1L培养基中含有MS基础培养基各工作液原料、6-苄氨基嘌呤0.5mg/L、吲哚丁酸0.1mg/L、蔗糖30000mg/L、琼脂10000-15000mg/L；

所述生根培养基包括：1L培养基中含有1/2MS基础培养基各工作液原料、吲哚丁酸0.6mg/L、蔗糖30000mg/L、琼脂10000-15000mg/L。

2.如权利要求1所述的大樱桃砧木吉塞拉培养基，其特征在于，所述MS培养基的工作液包括：大量元素、微量元素、肌醇、有机溶液和铁盐；

所述大量元素包括硝酸铵NH₂NO₃、硝酸钾KNO₃、氯化钙CaCl₂·2H₂O、硫酸镁MgSO₄·7H₂O和磷酸二氢钾KH₂PO₄；

所述微量元素包括碘化钾KI、硼酸H₃BO₃、硫酸锰MnSO₄·4H₂O、硫酸锌ZnSO₄·7H₂O、钼酸钠Na₂MoO₄·2H₂O、硫酸铜CuSO₄·5H₂O和氯化钴CoCl₂·6H₂O；

所述有机溶液包括烟酸、盐酸吡哆醇和甘氨酸；

所述铁盐包括FeSO₄·7H₂O和Na₂-EDTA·2H₂O。

3.如权利要求1所述的大樱桃砧木吉塞拉培养基，其特征在于，所述MS培养基的工作液浓度为：硝酸铵NH₂NO₃1650mg/L、硝酸钾KNO₃1900mg/L、氯化钙CaCl₂·2H₂O440mg/L、硫酸镁MgSO₄·7H₂O370mg/L、磷酸二氢钾KH₂PO₄170mg/L；

碘化钾KI0.83mg/L、硼酸H₃BO₃6.2mg/L、硫酸锰MnSO₄·4H₂O22.3mg/L、硫酸锌ZnSO₄·7H₂O8.6mg/L、钼酸钠Na₂MoO₄·2H₂O0.25mg/L、硫酸铜CuSO₄·5H₂O0.0025mg/L和氯化钴CoCl₂·6H₂O0.0025mg/L；

肌醇：100mg/L；

烟酸0.5mg/L、盐酸吡哆醇0.5mg/L、盐酸硫胺素0.5mg/L、甘氨酸2.0mg/L；

FeSO₄·7H₂O27.8mg/L、Na₂-EDTA·2H₂O37.3mg/L。

4.如权利要求1所述的大樱桃砧木吉塞拉培养基，其特征在于，所述诱导培养基pH值5.8-6.0，增殖培养基pH值5.8-6.0，生根培养基pH值5.8-6.0。

5.一种利用权利要求1所述的大樱桃砧木吉塞拉培养基的组培方法，其特征在于，该组培方法包括：

步骤一，在植物早春发芽时，采集健壮的无病虫害大樱桃砧木吉塞拉6号的嫩叶、生长点、腋芽，作为组织培养的外植体，将采集到的外植体用洗衣粉水清洗干净，再放在流水下冲洗30min，在超净工作台上于培养皿中用75%酒精消毒10-60s，再用无菌水冲洗3-5遍，之后用质量百分比为0.1%的升汞消毒3-8min，无菌水冲洗3-5遍；

步骤二，将消毒后的外植体接种到诱导培养基上，送入培养室进行无菌培养，培养基为MS+6-BA1.0mg/L+IBA0.1mg/L+蔗糖30000mg/L+琼脂10000-15000mg/L；经诱导分化后，得到丛生芽，将丛生芽转移到增殖培养基中进行增殖培养，得到组培苗，增殖培养基为MS+6-BA0.5mg/L+IBA0.1mg/L+蔗糖30000mg/L+琼脂10000-15000mg/L；

步骤三，将分花苗接种在生根培养基中进行生根培养，生根培养基为1/2MS+IBA0.6mg/L+蔗糖30000mg/L+琼脂10000-15000mg/L，暗培养10-12d，再光照培养3周，得到扎根的组培苗；

步骤四，将扎根后的组培苗炼苗3d，移栽到蛭石为基质的栽培盘中在温室内锻炼，当组培苗移栽成活后40-60d，移栽到大田中。