[发明专利]香豆素β抑制癌细胞生长的应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物医学领域，具体涉及香豆素β抑制癌细胞生长的应用。

背景技术

在医学上，癌是指起源于上皮组织的恶性肿瘤，是恶性肿瘤中最常见的一类。相对应的，起源于间叶组织的恶性肿瘤统称为肉瘤。肿瘤是机体在各种致瘤因素作用下，局部组织的细胞在基因水平上失去对其生长的正常调控导致异常增生与分化而形成的新生物。新生物一旦形成，不因病因消除而停止生长，他的生长不受正常机体生理调节，而是破坏正常组织与器官，这一点在恶性肿瘤尤其明显。与良性肿瘤相比，恶性肿瘤生长速度快，呈浸润性生长，易发生出血、坏死、溃疡等，并常有远处转移，造成人体消瘦、无力、贫血、食欲不振、发热以及严重的脏器功能受损等，最终造成患者死亡。

癌细胞的繁殖速度很快，远超过传统药物杀灭癌细胞的速度，因此，使用传统药物，防止癌细胞扩散效果并不明显。放化疗的时候射线杀死的是照射范围内的所有细胞，而不仅是肿瘤细胞，也杀死人体的正常细胞。放、化疗常见的毒副作用：恶心、呕吐、腹泻、脱发、白细胞下降、放射性胃肠炎、肺纤维化、肝功能受损等。不少肿瘤病人并不是死于肿瘤本身，而是死于放、化疗引起的并发症。

发明内容

为了解决现有技术中存在的问题，本发明提供了香豆素β抑制肿瘤生长的应用。

本发明涉及香豆素β抑制肿瘤生长的应用，所述癌细胞为MG-63骨肉瘤细胞、肺腺癌细胞A549、乳腺癌MCF-7、肝癌细胞HEPG2、膀胱癌细胞EJ、T24、人宫颈癌细胞HELA、人结肠癌细胞HT29、人胰腺癌细胞PANC-1、人乳腺癌细胞MDA。

使用灭菌PBS配置1mg/ml的PBS香豆素β溶液，选取各种癌细胞进行细胞生长试验，使用MTT方法检测细胞生长情况。

本发明相对于现有技术具有以下优点：

1、本发明的香豆素β对实验用到的三种骨肉瘤细胞均有抑制作用，且均强于同浓度下的临床用药甲氨蝶呤的抑制活性，香豆素β对于MG-63的抑制活性最强，达到75％左右。

2、本发明的香豆素β可以引起MG-63细胞的凋亡发生，并有浓度依赖性，主要引起细胞进入早期凋亡，由E，F可以看出香豆素β对细胞周期无明显影响。

3、本发明的香豆素β对肺腺癌细胞A549系有最强的抑制作用，对人乳腺癌MCF-7的抑制作用其次，对人肝癌细胞HEPG2、膀胱癌细胞EJ和T24有一点抑制作用，对人宫颈癌细胞HELA、人结肠癌细胞HT29、人胰腺癌细胞PANC-1、人乳腺癌细胞MDA有轻微抑制活性。

4、本发明的香豆素β对这人成纤维细胞HSF、人肝星形细胞LX-2、人胚肾T细胞293t、人脐静脉血管内皮细胞huvec等四种人正常细胞的生长影响不大，对HSF和LX-2有轻微抑制。

附图说明

图1为香豆素β(ab)和对骨肉瘤的抑制作用图；

图2为香豆素β(ab)对MG-63骨肉瘤细胞凋亡和周期的作用图；

图3为香豆素β(ab)对癌细胞抑制作用图；

图4为香豆素β(AB)对正常细胞抑制作用图。

具体实施方式

以下结合附图，对本发明的一种香豆素β抑制癌细胞生长的应用做进一步的详细说明。

实施例1：香豆素β和对三种骨肉瘤细胞的生长抑制作用

骨肉瘤是一种多见于年轻人的恶性肿瘤，现在主要的治療方法是切除和放射治療，还没有成熟的化疗方案，传统的一线抗癌药，如顺铂，对骨肉瘤的治療效果不理想，现在临床上主要使用甲氨蝶呤来进行辅助治療。于是想使用从箭毒木分出来的新化合物香豆素β体外检测下其对骨肉瘤是否有细胞毒性。使用灭菌PBS配置1mg/ml的PBS香豆素β溶液，选取各种肺癌癌细胞进行细胞生长试验，设置4个重复，使用MTT方法检测细胞生长情况，阳性对照使用甲氨蝶呤，结果数据使用T-test分析差异显著性，使用的细胞介绍如下。

表1实验使用到的骨肉瘤亚型: