[发明专利]一种培育植物根系发育增强并延缓叶片衰老的转基因植物的方法有效
| 申请号： | 201510787261.7 | 申请日： | 2015-11-17 |
| 公开（公告）号： | CN105296503B | 公开（公告）日： | 2019-03-08 |
| 发明（设计）人： | 胡梦芸;赵学强;刘茜;门福圆;张颖君;孙丽静;童依平;李辉 | 申请（专利权）人： | 河北省农林科学院粮油作物研究所;中国科学院遗传与发育生物学研究所 |
| 主分类号： | C12N15/29 | 分类号： | C12N15/29;C12N15/113;C12N15/11;C12N15/82;A01H5/06;A01H5/00;A01H6/46 |
| 代理公司： | 石家庄轻拓知识产权代理事务所(普通合伙) 13128 | 代理人： | 张培元 |
| 地址： | 050035 河北省石*** | 国省代码： | 河北;13 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 培育 植物 根系 发育 增强 延缓 叶片 衰老 转基因 方法 | ||
1.增强植物根系生长发育并延缓叶片衰老的方法，其特征在于：
首先构建含有SEQ ID NO：1所示基因的重组表达载体，然后利用所得重组表达载体构建目的植物，鉴定筛选阳性植株，得到与正常植物相比根系发育增强且衰老放缓的转基因植物；
构建重组表达载体的方法如下：先将SEQ ID NO：1所示的TaGS2-A1基因连接在表达载体pUBI:cas 的Ubiquitin 启动子下，然后将TaGS2-A1自身启动子替换Ubiquitin 启动子，最终构建成为具有自身启动子+基因的重组表达载体pTaGS2::TaGS2-A1；
所述植物为小麦。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：构建目的植物的方法如下：将正确连接TaGS2-A1基因的重组表达载体和带有Bar基因的pAHC25载体用基因枪轰击的方法转化小麦的幼胚，经过幼胚诱导、高渗培养、打枪和恢复培养过程，将转化后的小麦幼胚愈伤置于含有双丙氨磷的筛选培养基上进行分化筛选，具有除草剂抗性的幼芽伸长、生根、练苗移栽，得到T0代转基因植株。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：鉴定筛选阳性植株的方法如下：根据重组质粒pTaGS2::TaGS2-A1载体上的序列设计扩增引物，其正向引物的核苷酸序列如序列表中的SEQ ID NO：8所示，其反向引物的核苷酸序列如序列表中的SEQ ID NO：9所示；反应条件为94℃ 2 min ，98℃ 10 s，53℃ 30 s，68℃ 3 min， 39 个循环，68℃ 延伸7 min，通过凝胶电泳图谱鉴定筛选阳性植物，然后PCR追踪检测每代自交繁种，确保目的基因稳定遗传，得到T3 、T4 代稳定转基因株系。
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