[发明专利]一种猪鲜精保存长效稀释粉及制备方法与应用

说明书

技术领域

本发明属于家畜繁殖技术领域，涉及一种猪鲜精保存长效稀释粉及制备方法与应用。

背景技术

随着猪人工授精技术在集约化养猪场中的推广与应用，精液保存技术越来越受到重视，并日益显示出降低公猪饲养量和饲养成本、加快猪群品种改良、减少疾病传播等多方面优势。为此，近年来常温保存精液技术已广泛应用于猪的人工授精中，国内外研究者围绕猪精液常温保存稀释液开展了大量的研究工作，并研制出应用效果较好的稀释液配方。市场上的稀释粉一般分为短效（2-3天）、中效（3-5天）和长效（5-7天）等3种。在文献中能够检索到的稀释液种类中，BTS最为常见，为保存2-3天的短效稀释液。就目前而言，国内养猪企业使用的鲜精稀释粉大多从韩国、日本、西班牙、美国、比利时等等国家进口，价格较高。据市场调查，保存2-3天的短效稀释粉平均需5-7元/每袋，中效和长效的稀释液价格更高。我国大多数大、中型养猪企业人工输精所用精液来自当天采集，或来自存储2-3天的精液。如此段的精液存储时间必将给企业增加人力、物力和财力负担，降低企业经济效益。随着我国生猪市场集约化和规模化发展，猪精液高效、长期保存技术越来越重要。本项目组成员在结合多年猪精液鲜精保存技术研究的基础上，借鉴国内外猪精液保存方面最新研究成果，经过大量试验验证开发出一种新的猪精液保存长效稀释粉，而且成本较低，平均每袋长效稀释液成本在3元左右，能够更好服务于我国生猪企业的快速、健康发展。

就稀释液成分和功能分析，稀释液中的主要成分有：稀释剂(扩大精液容量)、营养剂(提供精子代谢所需的营养)、保护剂(缓冲不良环境对精子的影响)和抗菌剂。附睾中的精子存活时间很长(可长达17d之久)，这与附睾中精子所处的理化环境密切相关，附睾中的精子处于酸性环境中，并且保持高渗脱水状态，精子的活动完全被抑制，同时附睾中精子带有负电荷可防止精子凝集。除此之外，稀释液中含有针对性的抗菌成分可防止精液中细菌的生长和生殖性疾病的传播。然而，稀释剂在延长保存精子活性的同时，对精子也有些负面影响，会导致精子活力逐渐丧失及膜损伤增加。如果稀释过度，尤其是使用单纯的电解质则对精子的损伤更大。可能是稀释剂保存过程中精子细胞失去了一些重要的成分，而且稀释剂中的保护剂可能也对精子的结构和活性造成负面影响，从而影响了精子质膜的功能。

鲜精的pH值一般在7.2－7.5之间，较低的pH值能抑制精子活力和新陈代谢。大多数猪精液稀释剂中有较高浓度的葡萄糖使精子内pH值维持在6.0以下，使猪精子的糖酵解代谢很弱。稀释剂中的离子强度对精子保存可能不起关键性作用。稀释液中非离子物质(如葡萄糖等)保证了渗透压浓度。稀释剂中碳酸氢钠和柠檬酸钠作为缓冲液。氯化钾以低浓度用于维持Na^＋-K⁺泵，防止细胞外K⁺耗竭而使细胞失去活力。EDTA能捕获二价的金属离子，尤其是Ca^2＋，可能抑制跨膜运动而阻止获能的启动和顶体反应。稀释剂中使用EDTA对推广猪精子液态保存是很重要的一步。此外，在精液保存过程中，精子呼吸代谢会产生大量的活性氧族(reactiveOxygenSpecies,ROS)，其中的氧自由基(O^2-、H₂O₂和-OH)能使精子细胞膜中不饱和脂肪酸发生过氧化反应，导致精子质膜损伤。利用抗氧化剂如含有硫氢基团的物质，可能对稳定精子质膜有重要作用，也可抑制获能，从而提高精子液态保存的成活率。基于对上述猪鲜精保存原理的认识，本项项目组经过长期大量试验后，在常规稀释粉BTS基础上，适当添加了①聚乙烯醇，其作用是增加稀释液渗透压而且能够有效降低精子聚头现象，增加单个精子游动性；②半胱氨酸，其增强精子在储存过程中的抗氧化损伤能力；③肌醇，其是细胞膜的稳定剂，更好维持精子在储存过程中质膜的稳定性，④提高青霉素含量，其作用是增强精液抗菌能力。在猪场和种公猪站的应用证明了该猪精液保存长效稀释粉质量的可靠性。

发明内容

为开发高效、低价猪鲜精稀释粉，打破我国养猪企业稀释粉长期依赖进口的局面，本科研团队经过不断的研究和创新，最终选择在BTS基础上适量添加聚乙烯醇、半胱氨酸、肌醇和青链霉素等物质，分别从增加精子游动性、抗氧化能力、增加精子质膜稳定性和提高精液抗菌能力等方面，综合增加猪精液体外保存质量，达到长期（5-7天）保存的目的。

本发明有效降低了猪场运行管理成本，提高猪场生产水平。本发明提供的猪鲜精保存长效稀释粉配方如下：

一种猪鲜精保存长效稀释粉，其特征在于它是由下述重量份数的原料组成：