[发明专利]一株具有益生特征的罗伊氏乳杆菌菌株及其应用

说明书

技术领域

本发明属于微生物及其应用领域，具体涉及一株具有益生特征的罗伊氏乳杆菌菌株及其应用。

背景技术

饲料中使用抗生素在促进畜禽生长的同时，其弊端日益明显，包括：耐药菌株的产生和流行、引起机体内源感染或二重感染、导致机体免疫功能下降、药物在畜产品中残留并通过食物链影响人类健康和生态环境。2012年中国年产抗生素达21万吨，其中有近半被用于了畜牧养殖业，国内抗生素用量分别超出美国的4倍以上、部分欧盟国家10倍以上。由于大量使用抗生素导致畜禽肠道内微生物产生大量耐药基因，这些耐药基因随粪便一起被排泄到外界环境。一项最新研究发现，在施用养殖场粪肥后，中国商用养猪场周围土壤中抗生素耐药基因的种类和浓度超出森林土壤。携带耐药基因微生物可随着河流、地下水或者农产品被扩散，给人类带来潜在健康危险。2002年世界卫生组织已提出减少食用动物中抗生素使用的全球原则，欧盟已于2006年禁止在饲料中使用抗生素，美国也将于2015年禁止在饲料中使用抗生素。我国也制订了禁止和逐步淘汰绝大部分饲用抗生素政策和措施，《中国饲料工业1996～2020年发展战略》和《生产绿色食品的饲料添加剂使用准则》中也明确规定了今后我国饲料生产和发展的方向，将逐步控制或减少传统抗生素在饲料中添加的种类和数量，促进我国畜牧业健康可持续发展。随着《饲料和饲料添加剂管理条例》和《饲料原料目录》的正式实施，禁用饲用抗生素也将进入实施阶段，因此开发合适抗生素替代品成为当前最迫切任务。

目前，国内外公认的饲料中抗生素替代品包括微生态益生菌制剂、抗菌肽、酶制剂、中草药、植物提取物和酸化剂等6大类，在多种抗生素替代品中，益生菌由于在免疫功能调节、肠道炎症性疾病治疗、肠道应激综合征和腹泻防治等方面发挥重要作用日益受到重视。目前市面上在售的益生菌类产品质量良莠不齐，普遍存在菌种来源不明、宿主特异性差、功能不明确，甚至存在鱼目混珠现象。

动物肠道中寄住中大量微生物，其中乳酸杆菌是在动物消化道中为主要有益菌群，其在维持肠道健康、促进机体免疫系统的发育与成熟等方面发挥重要作用。猪肠道中乳酸杆菌有嗜酸乳酸杆菌(Lactobacillusacidophilus)、罗伊氏乳杆菌(Lactobacillusreuteri)、植物乳酸杆菌(Lactobacillusplantarum)、纤维二糖乳酸杆菌(Lactobacilluscellobiosus)、发酵乳酸杆菌(Lactobacillusfermentum)、唾液乳酸杆菌(Lactobacillussalivirius)、短乳酸杆菌(Lactobacillusbrevis)等。罗伊氏乳杆菌(L.reuteri)是目前已报道的几乎天然存在于所有脊椎动物和哺乳动物肠道内的乳酸菌，对肠黏膜上皮细胞有较强的粘附能力。L.reuteri在抗病毒方面效果非常显著。Oh等发现，哺乳仔猪饲喂L.reuteriHY25101菌株后能更有效预防PEDV感染。Seo等研究发现，L.reuteri(Probio-16)可以抑制轮状病毒对非洲绿猴上皮细胞系TF-104感染。在治疗由轮状病毒引起腹泻上L.reuteri有明显效果，尤其是儿童。L.reuteri能明显缩短由轮状病毒导致腹泻时间，而且L.reuteri添加量越多，腹泻停止时间越快。L.reuteri能产生一种被称为罗伊氏菌素(Reuterin)的广谱抗菌物质，它能广泛地抑制大肠埃希氏杆菌、鼠伤寒杆菌、白假丝酵母菌、枯草芽孢杆菌、黄曲霉菌、空肠弯曲杆菌及产芽孢梭菌等病菌。Frese等比较了来自8种不同脊椎动物的L.reuteri基因组序列，发现它们之间存在根本性差异，L.reuteri为适应不同动物肠道微环境其基因组序列也发生相应改变。因此从健康动物肠道内分离抗逆性强、功效突出的乳酸杆菌是筛选饲用益生菌重要途径之一。

发明内容

为了克服现有技术的缺点与不足，本发明的首要目的在于提供一株从健康动物肠道筛选出的罗伊氏乳杆菌(Lactobacillusreuteri)。该乳杆菌具有益生特征，能耐酸和耐胆盐，抗逆性强；对肠上皮细胞粘附能力强；对猪常见致病菌具有一定的抑制作用；可抑制产肠毒素大肠杆菌(ETECK88)对肠上皮细胞的损伤；可促进肠上皮细胞增殖；同时在体外肠上皮细胞模型中该乳杆菌具有较强免疫调节功能。

本发明的另一目的在于提供所述的罗伊氏乳杆菌的应用。

本发明的目的通过下述技术方案实现：