[发明专利]一种从乳鸽骨骼中提取的乳鸽小分子肽及其提取方法在审
申请号: | 201510745794.9 | 申请日: | 2015-11-06 |
公开(公告)号: | CN105368902A | 公开(公告)日: | 2016-03-02 |
发明(设计)人: | 潘爱国 | 申请(专利权)人: | 潘爱国 |
主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C07K1/14 |
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地址: | 100024 北京市朝阳*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 乳鸽 骨骼 提取 分子 及其 方法 | ||
1.一种从乳鸽骨骼中提取乳鸽小分子肽的方法,其特征在于,依次包 括如下步骤:(1)制备发酵剂;(2)乳鸽骨骼前处理;(3)初级 微生物发酵;(4)电解初级乳鸽蛋白;(5)酒精激活胰浆制备;(6) 酶解过程;(7)后处理过程。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,
步骤(1)制备发酵剂过程中,使用有益菌株的液体培养制备发 酵剂,包括枯草芽孢杆菌、双歧螺杆菌、鼠李糖乳杆菌、光合菌、地 衣芽孢杆菌,还加入营养素,所述的营养素为麦芽汁;
步骤(2)乳鸽骨骼前处理中,采用高压蒸煮的方法得到骨汤;
步骤(3)初级微生物发酵中,加入促产剂,所述的促产剂为植 酸质,发酵得到初级微生物发酵的乳鸽蛋白,即初级乳鸽蛋白;
步骤(4)电解初级乳鸽蛋白中,将所述的初级乳鸽蛋白进行电 解,得到乳鸽寡肽骨汤;
步骤(5)酒精激活胰浆制备中:胰脏做蛋白酶来源,采用食用 酒精一步激活形成胰酶,形成酒精激活胰浆;
步骤(6)酶解过程中:乳鸽寡肽骨汤、酒精激活胰浆按照一定 质量比进行酶解,分三次加入所述酒精激活胰浆,得到初级乳鸽小分 子肽;
步骤(7)后处理过程中:经过后处理得到乳鸽小分子肽。
3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,具体方法如下:
(1)制备发酵剂:使用有益菌株的液体培养制备发酵剂,称取 枯草芽孢杆菌10重量份,双歧螺杆菌10重量份,鼠李糖乳杆菌40 重量份,麦芽汁15重量份,光合菌20重量份,地衣芽孢杆菌5重量 份混合在一起,并置入到盛装有培养基的三角瓶中,进行复合培养, 所述的培养基为营养琼脂培养基,在所述三角瓶中进行培养的温度为 37℃,在200-250rpm/min下培养18-20h,使菌体或者孢子浓度达到 5×1013个/升(CFU/L),制得发酵剂。
(2)乳鸽骨骼前处理:将新鲜的乳鸽骨骼破碎,清洗,在蒸煮 罐中,采用温度为130℃以上温度,压力0.17-0.18MPa高压蒸煮 300-400min,骨渣排出,汤油导入汤油储罐中分层分离,得到骨汤,
(3)初级微生物发酵:将步骤(2)得到的骨汤转入至初级发酵 生产罐中,并加入所述骨汤重量的0.5-0.8%的促产剂,所述的促产剂 为植酸质,在35-38℃的低温下发酵8-10h,然后升温至160-200℃继 续发酵5-8h,得到初级微生物发酵的乳鸽蛋白,即初级乳鸽蛋白。
(4)电解初级乳鸽蛋白,将所述的初级乳鸽蛋白进行电解,使 用常规的蛋白质电解法,电解过程中,槽电压为20-50mV,电解时间 为3-5h,取三个试样测试,每个试样中的乳鸽肽的分子量范围均不超 过800道尔顿时,则停止电解,得到乳鸽寡肽骨汤。
(5)酒精激活胰浆制备:酒精激活胰浆制备过程如下:在胰酶 激活器中,放入洗净的胰脏做蛋白酶来源,采用食用酒精一步激活形 成胰酶,所述食用酒精的加入量是所述胰酶质量的2倍,所述食用酒 精的体积浓度是45%,所述激活时间为60-80h,激活温度为6-8℃, 成为酒精激活胰浆。
(6)酶解过程:将所述乳鸽寡肽骨汤导入水解罐中,然后分三 次加入所述酒精激活胰浆,三次加入的所述酒精激活胰浆的质量之比 为1∶1∶4,第一次是在所述酶解开始时加入,第二次是在所述酶解进 行1h时加入,第三次加入是所述酶解进行2h时加入,所述酶解总时 间为7h,所述酒精激活胰浆的加入质量是乳鸽寡肽骨汤质量的 1/9-1/5,在所述酶解过程中保持水解罐中pH为6.7-7.0;在所述酶解 过程中第一次加入酒精激活胰浆后至第二次加入酒精激活胰浆前的 酶解温度为60℃,第二次加入酒精激活胰浆后的酶解温度为45℃, 得到初级乳鸽小分子肽。
(7)后处理过程:经过所述酶解过程,即经过所述酒精激活胰 浆在水解罐中的水解,成为水解最终的混合液体,经过过滤后导入浓 缩罐进行浓缩,浓缩温度为50℃,浓缩至少2h,之后降温,在降温 至30℃时,测定波美度不小于30时,停止浓缩,将浓缩液煮沸灭菌, 喷粉干燥,水分含量降至2.5%以下,送入储罐,密封包装,得到乳 鸽小分子肽。
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