[发明专利]萤火虫荧光素酶热稳定性改造的方法

权利要求书

1.一种提高萤火虫荧光素酶热稳定性的方法，包括在现有荧光素酶f1基因的N端至少连接如lable 1所述的序列，且在同一基因的C端至少连接如lable 2所述的序列，其特征在于，lable 1 与lable 2能够共价结合，序列分别为SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。

2.一种能够表达合成萤火虫荧光素酶的多核甘酸序列，其特征在于，其序列如SEQ IDNO.3所示。

3.含有如权利要求2所述的多核苷酸序列的重组表达载体。

4.含有如权利要求3所述重组表达载体的大肠杆菌工程菌。

5.一种含有萤火虫荧光素酶的酶液，其特征在于，由权利要求4所述的大肠杆菌工程菌在发酵培养基中发酵培养表达、纯化获得。

6.根据权利要求5所述的酶液，其特征在于，该酶液可以在不超过60℃的温度下，催化荧光素反应产生荧光。

7.根据权利要求5所述的酶液，其特征在于，所述发酵培养的培养基为：大豆蛋白胨10~12 g/L，葡萄糖10~20 g/L，Na₂HPO₄ 4~6 g/L，K₂HPO₄ 1~3 g/L，NH₄Cl 0.5~1 g/L，NaCl 0.1~0.5 g/L，MgSO₄·7H₂O 0.1~0.5 g/L，AMP，1μL/mL。