[发明专利]鱼用儿茶素制剂的制备方法

说明书

技术领域

儿茶素为茶叶中最主要的天然活性成分，具有多种药理和保健活性。本发明涉及一种新型、高生物利用度的鱼用儿茶素保健制剂的制备方法及其评价。

背景技术

目前，由于工农业的快速发展和人类对自然界的不断索取导致的环境污染、气候变化等对我国水域环境、水产渔业养殖的影响也已逐渐显现，尤其在我国一些经济相对较发达的地区，由于化工厂、印染厂等高污染企业的大量污染物排放，已经对当地养殖和天然水源产生了严重污染。近年来，加之水产养殖集约化技术的不断深入，随后产生的由养殖水环境饲料残留、富营养化以及随之产生的水污染等因素引起的鱼类疾病日趋严重，尤其是饲料中高营养素引起的疾病逐渐突出。目前，养殖人员为了加快鱼类的生长，缩短饲养周期，在饲料中加入大量的营养素，从而导致肝脂质、营养素代谢紊乱导致的肝性疾病，虽然此类疾病无传染性，但危害可能远远超过传染病。

茶多酚(TeaPolyphenols,TP)是茶叶中多酚类及其衍生物的总称，主要有儿茶素、黄酮类、花青素和酚酸等物质组成，其中儿茶素类占茶多酚总量的60％-90％。儿茶素具有很强的生物活性，大量研究均表明儿茶素具有抗氧化清除自由基、抗心血管疾病、降“三高”(高血脂、高血压和高血糖)、抑菌消炎等多种药理保健作用。加之儿茶素类化合物具有排除体内有毒、有害物质(如清除重金属、自由基等)的能力，因此开发新型鱼用儿茶素类水生动物保健品对于发展我国绿色水产养殖、保证鱼类健康、降低渔药使用和水产品药物残留具有良好的研发前景。

同时由于我国是世界上最大的茶叶种植国和茶叶加工出口国，每年有大量高品质茶叶采摘、加工和生产，在这些高品质茶叶加工过程，大量次品、茶叶下脚料等被废弃，而其中仍含有大量的儿茶素类等天然活性成分，如果直接将这些次品、下脚料丢弃，不但大量资源被浪费，而且还对环境造成重大污染。因此，通过各种萃取技术将其中的大量的儿茶素制备纯化，然后应用于水产养殖领域，不仅减少了资源浪费，而且对发展茶产业循环经济具有重要影响。所以研发制备新型鱼用儿茶素类动物保健品，从而提高儿茶素稳定性和鱼体内的生物利用度，必将为儿茶素的开发利用与我国渔业生产的结合奠定坚实的基础。

结合本实验室前期研究积累和大量文献资料可知，由于儿茶素类化合物极性较大、水溶性较高，生物膜渗透性较差，加之小肠上皮细胞膜中转运蛋白(p-糖蛋白、多药耐药相关蛋白等)可能对儿茶素发挥“外排”作用，从而使得该类化合物口服后难以通过小肠上皮细胞进入全身血液循环，以致儿茶素类化合物在机体内的生物利用度较低，大部分在肠道中被各种酶或微生物所代谢和降解，或随粪便排泄到体外，从而使得该类化合物难以在体内发挥有效作用。因此，如何提高儿茶素类化合物生物膜转运速率，从而提高其生物利用度和增强儿茶素类化合物在作用靶部位的富集，是解决限制儿茶素大规模应用这一重要“瓶颈”的关键共性问题。目前在提高儿茶素生物膜转运方面的研究主要集中在儿茶素衍生化物的制备和应用上，近来年也有学者开展了儿茶素/茶多酚纳米粒制剂或注射用纳米乳剂的研究，但此类研究主要是针对人类保健品开发进行的有益探索，此类研究并不适合水产养殖上的应用。

具体而言，目前为了提高儿茶素类天然成分的生物膜转运速率或生物利用度，主要有如下几种剂型和制剂：

1、茶多酚的微囊制剂：该剂型以乙基纤维素为囊材，采用溶剂挥发技术制备茶多酚(TP)缓释微囊，该剂型可以提高TP稳定性和缓释作用，且包封率较高，但TP主要活性成分儿茶素的含量降低了，可能是乙基纤维素结构中含有多酚羟基，与儿茶素酚羟基结合使之难以溶出。

2、茶多酚的微球制剂：该剂型以生物可降解高分子材料羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯(HPMCP)为骨架材料，制备了TP微球，结果显示加入少量乳化剂可提高TP的包封率，具有一定的缓释效果。

3、茶多酚的脂质体：采用逆相蒸发法制备TP-维生素E脂质体，包封后可增加TP的稳定性，并具有长效特点，同时也可以显著提高其生物膜转运和生物利用度。

然而，上述这些能够显著提高儿茶素类化合物生物膜转运速率或生物利用度的制剂，均为针对人类的使用方式所制备，这些制剂难以用于鱼类动物。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种能提高儿茶素生物利用度的鱼用半固体胶囊制剂---鱼用儿茶素制剂的制备方法。

为了解决上述技术问题，本发明提供一种鱼用儿茶素制剂的制备方法，包括以下步骤：

1)、儿茶素溶液的配制：

将儿茶素溶解于超纯水，配制成浓度为9～11mg/mL(较佳为10mg/mL)的儿茶素EGCG液体；