[发明专利]低毒性人造Cathelicidins肽

说明书

低毒性人造Cathelicidins肽，它涉及三种人造抗菌肽。本发明解决了鸭Cathelicidins具有明显的细胞毒性和溶血活性，且热稳定性较低的问题。低毒性人造Cathelicidins KR‑15、Cathelicidins LR‑12和Cathelicidins QR16。本发明经过人为改造设计的低毒性人造Cathelicidins KR‑15、Cathelicidins LR‑12和Cathelicidins QR16的细胞毒性和溶血活性都明显低于鸭Cathelicidins，而且热稳定性优于鸭Cathelicidins。

技术领域

本发明涉及三种人造抗菌肽。

背景技术

Cathelicidins是一类具有广谱抗微生物活性的多功能抗菌肽，除了具有普通抗菌肽的活性特点以外，还具有其独特的结构特点和功能特点。完整的Cathelicidins是由三部分构成，N端的信号肽、C端的成熟肽以及中间保守的cathelin域三部分组成。当受到特定因子刺激时，C-端的成熟肽被蛋白酶水解下来，发挥其生物学功能。

根据Cathelicidins C-端成熟肽区域的结构特点，大体包括以下四类：α-螺旋Cathelicidins、延伸-螺旋Cathelicidins、环状Cathelicidins和β-片层Cathelicidins。其中α-螺旋结构的Cathelicidins是分布和种类最多的一类，在哺乳动物中发现的Cathelicidins大多数属于此类，在禽类中发现的Cathelicidins也都具有α-螺旋结构，一般含有23～40个氨基酸残基。

鸭子体内的cathelicidins基因(GenBank注册号:KT230679)被本发明发明人第一个发现，确定鸭Cathelicidins成熟片段为KRFWQLVPLAIKIYRAWKRR。虽然鸭Cathelicidins在微摩尔浓度下对多种细菌、真菌显示出很强的抑制活性，但是其具有明显的细胞毒性和溶血活性，而且热稳定性较低。

发明内容

本发明是为了解决鸭Cathelicidins具有明显的细胞毒性和溶血活性，且热稳定性较低的问题，而提供了三种人造Cathelicidins肽。

本发明低毒性人造Cathelicidins KR-15由KRFWQLVPLAIKIYR所示的氨基酸序列组成。

低毒性人造Cathelicidins LR-12由LAIKIYRAWKRR所示的氨基酸序列组成。

低毒性人造Cathelicidins QR16由QLVPLAIKIYRAWKRR所示的氨基酸序列组成。

本发明低毒性人造Cathelicidins KR-15、Cathelicidins LR-12和Cathelicidins QR16均可采用多肽固相合成法(SPPS)制备。

本发明经过人为改造设计的低毒性人造Cathelicidins KR-15、CathelicidinsLR-12和Cathelicidins QR16的细胞毒性和溶血活性都明显低于鸭Cathelicidins，而且热稳定性优于鸭Cathelicidins。

具体实施方式

本发明技术方案不局限于以下所列举具体实施方式，还包括各具体实施方式间的任意组合。

具体实施方式一：本实施方式低毒性人造Cathelicidins KR-15的氨基酸序列为KRFWQLVPLAIKIYR。

本实施方式低毒性人造Cathelicidins肽采用多肽固相合成法(SPPS)制备，ESI-MS鉴定分子量，Cathelicidins KR-15纯度大于95％。

具体实施方式二：本实施方式低毒性人造Cathelicidins LR-12的氨基酸序列为LAIKIYRAWKRR。