[发明专利]—种用于人体肝细胞毒理试验改良培养基的强化剂

说明书

技术领域

本发明涉及—种动物细胞培养技术，特别是—种用于人体肝细胞毒理试验改良培养基的强化剂。

背景技术

利用动物细胞培养技术来验证化合物毒理学实验测试目前为止最为高效和可行的方法。随着生物技术在化合物毒理学安全评价应用领域和市场需求量的不断扩大，提高动物细胞培养和毒理学试验、延长维持时间以获得可靠结果，成为优化动物细胞培养过程和毒理学实验的核心。

众所周知，动物细胞培养及毒理学试验的效果的经济性和效率起决定性作用的是培养基，培养基的优化是建立高效的动物细胞培养和毒理学试验过程的核心环节。因此，根据细胞在生长、代谢和毒理学试验表达过程中的营养需求，设计动物细胞培养基中营养物的成分、含量和配比是工作的重要内容。

国内外许多商业化的培养基—般由基础培养基和血清或替代物组成，显著影响细胞生长、代谢和毒理试验现象表达这些培养基—般仅能确保细胞的稳定传代，并不能较好地支持细胞生长和毒理试验效果的表达，因而阻碍了细胞毒理学实验的普及和应用。

市售的商业无血清培养基在血清替代方面多具有良好的表现，但在支持细胞培养和高效表达毒理学效果方面仍有诸多缺陷。因此，在进行动物细胞培养和毒理学实验时，多数无血清培养基难以充分、平衡地向细胞提供所需的营养物质。培养基利用率很低，造成极大的浪费。

发明内容

本发明要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提出了—种提高培养基利用率的用于人体肝细胞毒理试验改良培养基的强化剂，以强化和丰富细胞培养基中的重要营养物质，能有效促进细胞在培养基中的生长和被试物加快进入细胞液表达，延长活细胞维持时间。

本发明要解决的技术问题是通过以下技术方案来实现的，—种用于人体肝细胞毒理试验改良培养基的强化剂，其特点是：在双蒸馏水中添加有葡萄糖和氨基酸，

其中每升双蒸馏水中葡萄糖和氨基酸的添加量为:

葡萄糖320—500克、谷氨酞胺20—80克、

天冬酞胺2—10克、脯氨酸10—20克、

苏氨酸20—40克、丝氨酸2—6克、

组氨酸2—6克、赖氨酸8—15克、

半胱氨酸2—5克、四甲基戊二酸0.1—0.5克、

α-酮戊二酸0.1—2克、2-巯基乙醇0.1—1.0克。

本发明要解决的技术问题还可以通过以下技术方案来进—步实现，所述的双蒸馏水为无热源双蒸馏水。

本发明要解决的技术问题还可以通过以下技术方案来进—步实现，每升双蒸馏水中葡萄糖和氨基酸的含量为：

葡萄糖300克；谷氨酞胺25克；

天冬酞胺2克；脯氨酸6克；

苏氨酸15克；丝氨酸2克；

组氨酸2克；赖氨酸20克；

半胱氨酸2克；四甲基戊二酸.0.5克；

α-酮戊二酸2克；2-巯基乙醇0.5克。

本发明提供一种用于人体肝细胞毒理试验改良培养基的营养强化剂，以强化培养基中的重要营养物质，提高细胞培养及其在毒理学试验中表达效率。满足动物细胞培养和细胞毒理学实验的需要。所述营养物添加剂中含有葡萄糖以作为细胞获取营养的主要碳源物质，为细胞生长和毒理学表达提供必要的能量供给；含有的氨基酸以作为细胞合成自身蛋白和蛋白产物的重要元素，能决定细胞在培养过程中所能达到的最大活细胞密度以及细胞活性的维持时间。

本发明与现有技术相比，本发明的强化剂添加到培养基中后能有效提高细胞在培养基中的活细胞密度，延长活细胞在培养基中的维持时间，延缓细胞的死亡；添加到培养基中后能有效提高动物细胞的毒理学评价效果稳定性和可靠性；本发明组分明确，具有较强的通用性，能适用于多种动物细胞培养基；添加到培养基中后细胞在做毒理学暴露试验时提高细胞染毒效率；本发明成分简单，不含动物来源成分，产品品质能保证；本发明成本较低，配制及使用方便，适于大规模使用。

具体实施方式

—种用于人体肝细胞毒理试验改良培养基的强化剂，在双蒸馏水中添加有葡萄糖和氨基酸，

其中每升双蒸馏水中葡萄糖和氨基酸的添加量为:

葡萄糖320—500克、谷氨酞胺20—80克、

天冬酞胺2—10克、脯氨酸10—20克、

苏氨酸20—40克、丝氨酸2—6克、

组氨酸2—6克、赖氨酸8—15克、

半胱氨酸2—5克、四甲基戊二酸0.1—0.5克、

α-酮戊二酸0.1—2克、2-巯基乙醇0.1—1.0克。