[发明专利]一种菊粉酶突变体发酵生产低聚果糖的方法

权利要求书

1.一种菊粉酶突变体发酵生产低聚果糖的方法，其特征在于，具体如下：以新鲜菊芋为原料，灭酶打浆后浸提2-8h，收集清液，清液经碱处理、除杂并脱色后作为反应原液，调节pH4.5～6.0，按每Kg菊芋添加菊粉酶650000～2000000U，控制温度在30℃，搅拌速度在50～200r/min的条件下反应4～12h，当低聚果糖最大聚合度降低到5时，停止反应，将水解物进行浓缩，干燥即为低聚果糖产品；

在37℃、pH＝5.0的条件下，1mL酶液在1h内水解菊芋果聚糖产生1μmol的三糖定义为一个酶活力单位U，其中三糖含果三糖和蔗果三糖；

所述菊粉酶氨基酸序列如核苷酸序列表SEQ ID No.5所示。

2.如权利要求1所述的一种菊粉酶突变体发酵生产低聚果糖的方法，其特征在于，所述菊粉酶的编码基因如核苷酸序列表SEQ ID No.4所示。

3.如权利要求2所述的一种菊粉酶突变体发酵生产低聚果糖的方法，其特征在于，所述菊粉酶的发酵液酶活力为60000-65000U/mL。

4.如权利要求1所述的一种菊粉酶突变体发酵生产低聚果糖的方法，其特征在于，鲜菊芋经洗涤、切片，然后用90℃的热水烫漂灭酶，干燥得菊芋干片；菊芋干片粉碎成粉末浸泡2h后打浆，然后40℃水浴浸提6h，板框过滤收集清液；所得清液即为粗菊芋浸提液；将提取液经碱处理除杂并脱色；将上述制备的菊芋浸提液调节pH 6.0，按每Kg菊芋添加菊粉酶700000U，控制温度在30℃，搅拌速度在150r/min的条件下反应10h，当低聚果糖最大聚合度降低到5时，停止反应，将水解物进行浓缩，干燥即为低聚果糖产品，产物中低聚果糖占总糖的比例为98.77％。