[发明专利]一种胆木无菌苗的诱导培养基及胆木脱毒快繁方法

说明书

技术领域

本发明涉及组培快速繁殖技术领域，更具体地，涉及一种胆木无菌苗的诱导培养基及胆木脱毒快繁方法。

背景技术

胆木（NaucleaofficinalisPierre）为茜草科乌檀属植物乌檀，以其枝、干、树皮等部位入药，具有清热解毒、消肿止痛等功效，是胆木浸膏片、胆木注射液等中成药的主要原料，其被广泛应用于乳腺炎、急性扁桃体炎，咽喉炎，支气管炎，肠炎，胆囊炎、肺炎，泌尿系感染等症的治疗。由于胆木为重要的医药原料，野生资源破坏严重，采集野生资源已经不能满足生产需要，开展规范化生产是解决药材短缺的有效途径，而种苗繁育是规范化生产的重要组成部分，由于胆木果实成熟周期较长，种子成熟度不一，加上种子狭小，种皮坚硬，休眠期长，导致胆木种苗繁育周期较长，苗木供应紧张，远远不能满足市场的需要，这使胆木在我国境内的推广栽培和资源利用受到了极大的限制。

利用植物组织培养技术建立胆木脱毒快繁体系是生产优质胆木优质种苗的有效途径，现有技术中有关胆木组培苗生产中都以胆木种子为外植体，阐述了胆木组培方法，其主要包括外植体消毒、丛生苗的诱导、生根和炼苗移栽等环节，从技术而言，其都属于胆木组培脱毒快繁体系，但是其体系中增殖培养基由6-BA和NAA组成，无法有效改善胆木无菌种子苗繁育中存在的出苗周期长、出苗率低等问题，在增殖培养中由于缺乏椰子乳等有机物质和TDZ等高效生长素，亦无法克服胆木组培中存在的繁殖效率低、年繁殖种苗数量有限等问题。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是克服现有技术存在的上述问题，首先提供一种胆木无菌苗的诱导培养基。

本发明的第二个目的是提供一种胆木无菌苗的增殖培养基。

本发明的第三个目的是提供一种胆木无菌苗的生根培养基。

本发明的第四个目的是提供一种胆木脱毒快繁方法。

本发明的目的是通过以下技术方案予以实现的：

一种胆木无菌苗的诱导培养基，包括含有0.1～10.0%有机添加物、0.05～0.2mg/LDA-6的3/4MS培养基。

优选地，所述有机添加物选自椰子水、胡萝卜泥、土豆泥。

更优选地，所述诱导培养基是含质量浓度为10%的椰子水和0.1mg/LDA-6的3/4MS培养基。

优选地，当在诱导培养基中添加0.05～0.5mg/LGA₃时，可以进一步提高无菌苗的出苗率，缩短出苗时间，此时含有GA₃的诱导培养基的pH值为5.6～6.0。

本发明还提供一种胆木无菌苗的增殖培养基，是在所述诱导培养基的基础上添加0.05～1.0mg/L6-BA、0.05～0.1mg/L的NAA；或者是在权利要求1所述诱导培养基的基础上添加0.05～1.0mg/LTDZ；此时增殖培养基的pH值为5.6～6.0，视种苗需求数量可增殖25～30d。

更优选地，所述增殖培养基中6-BA浓度为0.5mg/L，NAA浓度为0.1mg/L；或者所述增殖培养基中TDZ浓度0.1mg/L。

本发明还提供一种胆木无菌苗的生根培养基，是在所述诱导培养基的基础上添加0.1%～1.0%的活性炭或0.05～0.1mg/L的NAA；此时生根培养基的pH值为5.6～6.0。

本发明还提供一种胆木的脱毒快繁方法，包括以下步骤：

S1.将无菌的胆木种子接种于诱导培养基中，培养至无菌苗的长度为0.5～1.0cm；

S2.将无菌苗切割成带有1个顶芽或1～2个腋芽、且长度为1.0～2.0cm的茎段后接种于增殖培养基中培养；

S3.待长出微枝长度为2.0～3.0cm，接种于生根培养基中进行生根培养；

S4.将胆木苗进行室内炼苗后移栽至培养基质中完成胆木的脱毒快繁。

优选地，上述步骤S1、S2、S3所述培养条件为温度为25～28℃、湿度为70%～80%、光照强度为80～100lx、光照8～10h/d。

优选地，S3在生根培养基中培养至生根长度为1.5～2.0cm。

具体地，S4所述炼苗时将生根培养的胆木苗于隐蔽度为15%～20%的荫棚，炼苗7～10d。

优选地，S4所述培养基质为10%～15%蛭石，10%～15%牛粪，10%～15%椰糠和55%～70%土壤。