[发明专利]魔芋中神经酰胺含量测定方法

说明书

本发明公开了一种魔芋中神经酰胺含量测定方法：分别取神经酰胺乙酸乙酯提取液、神经酰胺乙醇提取液、标准品溶液，按照色谱条件进样，通过高效液相色谱采集谱图。本发明提供的魔芋中神经酰胺含量测定方法具有灵敏、快捷、重现性好的特点。

技术领域

本发明涉及一种魔芋中神经酰胺含量测定方法。

背景技术

魔芋(konjac)属于天南星科(Araceae)魔芋属(Amorphophallus)多年生宿根草本植物，其中神经酰胺的含量很高，可达0.15％～0.2％。魔芋作为一种富含神经酰胺类物质的资源植物引起人们极大的兴趣，神经酰胺(ceramide)，即N-脂酰神经鞘胺醇，是一种广泛存在于真核生物细胞中的信号传导物质，作为一种脂质分子以细胞膜的结构组成成份或胞内自由分子形式存在，参与调节细胞的生长、抑制、分化、衰老和凋亡等。近些年来，神经酰胺类物质已成为新兴的功能性医药保健品、食品和化妆品的重要活性成分，具有极大的应用价值。

发明内容

本发明提供了一种魔芋中神经酰胺含量测定方法。

本发明采用如下技术方案：

一种魔芋中神经酰胺含量测定方法：

分别取标准品溶液、供试品溶液，按照色谱条件进样，通过高效液相色谱采集谱图，标准品溶液包括神经酰胺乙酸乙酯提取液和神经酰胺乙醇提取液，其中：

神经酰胺乙酸乙酯提取液：精密量取经乙酸乙酯工艺制备的提取物，置于蒸发皿中，于70℃水浴蒸干，加甲醇超声溶解并定容，过0.45μm微孔滤膜，即得；

神经酰胺乙醇提取液：精密量取加有乙醇夹带剂经超临界提取的提取物，加体积分数95％乙醇稀释定容，再从中精密量取，加体积分数95％乙醇稀释定容，过0.45μm微孔滤膜，即得；

标准品溶液的配制：精密称定神经酰胺C6标准品，置容量瓶中，加甲醇超声溶解并定容至刻度，过0.45μm微孔滤膜，即得。

优选的，所述高效液相色谱的色谱条件：流动相溶剂流速0.8-1.2ml/min；醋酸缓冲液-甲醇等度洗脱；色谱柱柱温25～40℃；蒸发光散射检测器。

优选的，所述流动相溶剂为体积分数0.1％醋酸：甲醇＝7：93。

优选的，所述流动相溶剂为体积分数36％乙酸：甲醇＝7：93。

优选的，所述流动相溶剂流速1ml/min。

优选的，谱图采集时间为30分钟。

本发明提供的魔芋中神经酰胺含量测定方法具有灵敏、快捷、重现性好的特点。

附图说明

图1是本发明乙酸乙酯提取液色谱图；

图2是本发明乙醇提取液色谱图；

图3是本发明神经酰胺C6标准曲线图。

具体实施方式

下面的实施例是对本发明的进一步详细描述。

1实验仪器及材料

1.1实验仪器

高效液相色谱仪(型号：U3000；厂家：Thermo Fisher Scientific)，蒸发光散射检测器(型号：M100)；色谱柱：Kromasil 100-5C18(5μm，250×4.6mm)；甲醇(色谱级)；36％乙酸(分析纯)

1.2材料

乙酸乙酯提取液，乙醇提取液。

2实验内容

2.1色谱条件