[发明专利]黄芪提取物FQR-8及其在肿瘤细胞免疫治疗中的应用在审

专利信息
申请号: 201510707389.8 申请日: 2015-10-27
公开(公告)号: CN105154404A 公开(公告)日: 2015-12-16
发明(设计)人: 杨兆勇;李霞;许乐幸;汪康游;张志斐;白利平;张紫浓;李亚东;金媛媛 申请(专利权)人: 东营凤起生物科技发展有限公司
主分类号: C12N5/0784 分类号: C12N5/0784;C12N5/0783;A61K36/481;A61P35/00
代理公司: 北京华科联合专利事务所(普通合伙) 11130 代理人: 杨厚;王为
地址: 257081 山东省*** 国省代码: 山东;37
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摘要:
搜索关键词: 黄芪 提取物 fqr 及其 肿瘤 细胞 免疫 治疗 中的 应用
【权利要求书】:

1.一种黄芪提取物FQR-8,其特征是,所述提取物是将熟黄芪粉碎成浆液,经纤维素酶30分钟后灭活,高速离心,上清液浓缩后再次离心;将其加入乙醇,4℃过夜,离心得到沉淀;用去离子水溶解沉淀后,大孔吸附树脂XAD-16柱进行吸附;水清洗后,依次用20%甲醇、40%甲醇、60%甲醇、80%甲醇、100%甲醇,4℃下以流速0.18~0.20cm/min进行洗脱,分别接收洗液;收集OD420nm最大吸收值的组分,旋转蒸发、冷冻后,真空冷冻干燥获得白色粉末即为FQR-8。

2.一种利用黄芪提取物FQR-8诱导DC-CIK的方法,其特征是,所述方法依次包括以下步骤:

外周血采集:无菌抽取肿瘤患者外周血,肝素钠抗凝并充分混匀,避免凝血;

肿瘤抗原的获取:室温离心沉淀外周血,收集上层血浆,灭活备用;

单个核细胞分离、收集:生理盐水稀释混匀所得细胞沉淀物,轻轻加至淋巴细胞分离液表面,在650g条件下离心;离心结束后,加入生理盐水,混匀混匀;室温离心沉淀,弃上清,生理盐水再次悬浮混匀,室温离心沉淀;

FQR-DC-CIK细胞诱导培养:沉淀物用含黄芪提取物FQR-8的FQR-DC-CIK诱导培养基悬浮,并用白细胞稀释液稀释计数,置饱和湿度的二氧化碳培养箱中进行培养,期间根据细胞的生长状况适时换液扩增,直至细胞数量达到实验所需。

3.权利要求2所述的诱导方法,其特征是,FQR-DC-CIK细胞诱导培养液中,所用黄芪提取物FQR-8的浓度为0.01ug/ml~1mg/ml。

4.权利要求1所述黄芪提取物FQR-8在制备肿瘤细胞免疫治疗药物中的应用。

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