[发明专利]具有γ干扰素的抗原呈递癌症疫苗

说明书

本申请为分案申请，原申请的申请日为2012年10月22日，申请号为201280051821.7(PCT/US2012/061294)，发明名称为“具有γ干扰素的抗原呈递癌症疫苗”。

相关申请

本申请要求享有2011年10月20日提交的美国临时申请No.61/549681和2012年2月2日提交的美国临时申请No.61/594304的全部巴黎公约优先权及其权益，上述两篇临时申请通过引用并入本文，如同其全部内容在本文中阐述一样。

技术领域

本发明涉及治疗黑色素瘤、筛选适合治疗的受试者、物质组合物、方法和试剂盒。

发明背景

癌症的特征是缺乏对癌症有效的免疫应答。免疫应答的缺乏可由以下事实引起：例如许多肿瘤抗原是“自身抗原”；肿瘤细胞缺乏MHC的表达以及由此产生的肿瘤细胞缺乏肿瘤抗原的呈递；巨噬细胞与肿瘤的关联，该巨噬细胞表达降低免疫应答的细胞因子；以及调节性T细胞(Tregs)的免疫抑制活性。对肿瘤的免疫应答的缺乏还可以由以下事实引起：肿瘤细胞倾向于不表达那些刺激先天性免疫应答的分子，即刺激Toll样受体(TLRs)或核苷酸结合寡聚化结构域(NOD)样受体的分子。癌症包括实体肿瘤以及诸如白血病和骨髓发育不良综合征的血液癌症。

免疫系统包括细胞免疫、体液免疫、补体反应(complementresponse)。细胞免疫包括多种细胞和多种活动的网络，涉及树突细胞、CD8⁺T细胞(细胞毒性T细胞；细胞毒性淋巴细胞)和CD4⁺T细胞(辅助T细胞)。树突细胞(Dendriticcells，DCs)获得多肽抗原，其中这些抗原可以从DC的外部获得，也可以在DC的内部由感染生物体来生物合成。DC处理多肽，得到长度约10个氨基酸的肽，并将这些肽传输给MHCI类或MHCII类以形成复合体，并将复合体运(shuttles)到DC的表面。当携带MHCI类/肽复合体的DC与CD8⁺T细胞接触时，结果是CD8⁺T细胞的活化和增殖。对于MHCII类所起的作用，当携带MHCII类/肽复合体的DC与CD4⁺T细胞接触时，其结果是CD4⁺T细胞的活化和增殖(Munz等(2010)Curr.Opin.Immunol.22：89-93；Monaco(1995)J.LeukocyteBiol.57：543-547；Robinson等(2002)Immunology105：252-262)。尽管呈递抗原给T细胞的树突细胞能够“活化”该T细胞，活化的T细胞可能不能够具有有效的免疫应答。CD8⁺T细胞的有效的免疫应答通常需要DC通过一次或多次多个交互来在先刺激(priorstimulation)。这些交互包括CD4⁺T细胞与DC的直接接触(通过CD4⁺T细胞的CD40配体与DCs的CD40受体接触的方式)，或者TLR激动剂与树突细胞的toll样受体(TLRs)中的一个受体的直接接触。

体液免疫涉及B细胞和抗体。B细胞被转化成浆细胞，浆细胞表达并分泌抗体。初始B细胞的区别在于它们不表达标志物(marker)CD27，而抗原特异性B细胞则表达CD27(Perez-Andres等(2010)CytometryPartB78B(Suppl.1)S47-S60)。分泌的抗体随后可以与驻留在肿瘤细胞表面上的肿瘤抗原结合。结果是受感染的细胞或肿瘤细胞被抗体标记。随着抗体与受感染的细胞或肿瘤细胞的结合，结合的抗体介导(mediates)杀灭受感染的细胞或肿瘤细胞，其中杀灭细胞是由NK细胞进行的。尽管并没有以配置T细胞来识别靶抗原的方式对NK细胞进行配置来识别特定的靶抗原，但是NK细胞与抗体的恒定区域结合的能力使得NK细胞能够特异性地杀灭抗体所标记的细胞。NK细胞对抗体的识别是由与抗体的Fc部分结合的(NK细胞的)Fc受体介导的。这种类型的杀灭被称为抗体依赖性细胞毒作用(ADCC)。NK细胞也可以不依赖ADCC机理来杀灭细胞，在这种情况下这种杀灭需要在靶细胞中MHCI类的表达损失或缺乏(参见例如Caligiuri(2008)Blood112：461-469)。

可以使用“迟发型超敏反应”(delayedtypehypersensitivityresponse)技术来区分主要涉及细胞免疫的免疫应答或主要涉及体液免疫的免疫应答。迟发型超敏反应的阳性信号表明细胞应答(参见，例如Roychowdhury等(2005)AAPSJ.E834-E846)。