[发明专利]一种鸡特异性免疫增强剂的制备方法

权利要求书

1.一种鸡特异性免疫增强剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤1、免疫健康猪：取鸡目的疫苗作为抗原，对健康猪进行目的疫苗强化免疫；

步骤2、原材料预处理：采集免疫成功后猪的脾、胸腺及淋巴结，用纯化水洗净猪脾、胸腺及淋巴结，去其表面的筋膜及脂肪等组织，再用灭菌生理盐水反复冲洗；

步骤3、组织匀浆的制取：将步骤2所得洗干净的猪脾脏、胸腺及淋巴结剪碎，加入3倍体积的生理盐水，在4℃的条件下用胶体磨磨细，制得组织匀浆；

步骤4、反复冻融：将步骤3制取的组织匀浆于-70℃快速冷冻，之后再在30℃左右进行水浴融化，按照此冷冻和融化的方式共重复进行五次，然后通过冰冻离心机于4℃以3000-4000r/min离心20-30分钟，取上层红色液体，离心渣再用2倍的生理盐水稀释，再用胶体磨磨细，置于冰冻离心机于4℃以3000-4000r/min离心20-30分钟，取上层红色离心液体，将两次滤液混合在一起；

步骤5、超滤：将步骤4所得混合滤液用截流值为10KD的超滤膜加压超滤，滤液为分子量小于6000道尔顿的转移因子；

步骤6、除菌：将步骤5超滤得到的滤液用滤膜加压过滤除菌，即得鸡特异性免疫增强剂。

2.根据权利要求1所述的一种鸡特异性免疫增强剂的制备方法，其特征在于，在步骤1中，所用鸡目的疫苗选自鸡新城疫疫苗、鸡传染性法氏囊炎疫苗。

3.根据权利要求1所述的一种鸡特异性免疫增强剂的制备方法，其特征在于，在步骤1中，对健康猪进行目的疫苗强化免疫的过程如下：

对选择的健康猪利用目的疫苗进行皮下多点注射进行免疫，免疫共进行4次，每次免疫间隔一周，4次免疫的免疫剂量依次为50羽/头、100羽/头、200羽/头、500羽/头。

4.根据权利要求1所述的一种鸡特异性免疫增强剂的制备方法，其特征在于，在步骤1中，所选健康猪无传染病和寄生虫病，所选健康猪的体重约100kg。

5.根据权利要求1所述的一种鸡特异性免疫增强剂的制备方法，其特征在于，在步骤6中，所用滤膜的孔径为0.22um。