[发明专利]磷酸肌酸类化合物及其应用

说明书

技术领域

本发明属于制药技术领域，具体涉及一种磷酸肌酸类化合物及其应用。

背景技术

磷酸肌酸是一种含有高能磷酸键化合物，在肌肉收缩的能量代谢中发挥重要作用。它是心肌和骨骼肌的化学能量储备，并用于ATP的再合成。临床上采用肌肉注射或静脉注射外源性磷酸肌酸二钠盐来治疗缺血状态下的心肌代谢异常，以及在心脏手术时将磷酸肌酸二钠盐加入心脏停搏液中保护心肌。磷酸肌酸二钠盐作为心肌保护剂药品已经在国内外已上市应用多年。

目前外源性磷酸肌酸的制备方法有化学合成法、生物提取法和酶法。生物提取法和酶法由于成本高、相对效率较低等原因，一定程度上限制了其应用。用化学合成法制备磷酸肌酸是目前获得外源性磷酸肌酸的一个主要途径，其中以肌酐为原料合成磷酸肌酸的方法(专利200710038838.X)是目前应用最广的方法之一。在以肌酐为原料生产磷酸肌酸时，肌酐与三氯氧磷缩合反应过程中会有副反应，该副反应产物随后续工艺过程，最终形成与磷酸肌酸钠极性近似的水溶性副产物，易于混到产品中影响终产品质量，目前对副反应产物的检测未见有文献报道。

磷酸肌酸目前在临床上最主要的用途，是制成注射用磷酸肌酸钠。注射剂相比其它剂型，对产品的品质和安全性有更高的要求。对磷酸肌酸钠粗品及成品中因副反应产生的杂质化合物进行检测，并对之在终产品中实现有效控制，有助于提高药品质量稳定性和临床用药安全性。

发明内容

本发明主要提供了一种磷酸肌酸类化合物及其应用，确定了磷酸肌酸钠粗品及终产品中化合物Ia的具体结构，能加强对磷酸肌酸钠质量的有效控制。其技术方案如下：

一种磷酸肌酸二钠盐中杂质化合物的高效液相色谱检测方法，所述杂质化合物具有如下式(Ia)所示的结构：

以肌酐为原料生产磷酸肌酸钠，是当前主流的生产工艺之一。我们在质量提升研究过程中，发现了化合物Ia，它是工艺过程中一个主要的副产物。该化合物的结构，从未见过文献报道，推断经由以下的途径生成：

该化合物的理化性质和磷酸肌酸钠接近，易于混在终产品中影响产品质量，因此有必要对粗品及终产品中的化合物Ia进行含量检测，控制该成分的含量以保证产品质量。

具体检测条件及检测方法为：

检测条件如下

以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相中以乙腈或甲醇为有机相、以缓冲盐及离子对试剂的水溶液为水相，检测器为紫外检测器。

其中，有机相与水相的体积比为0-40:60-100，优选的，为20:80。

优选的，有机相为乙腈。

优选的，水相中缓冲盐为磷酸二氢钠或磷酸二氢钾，离子对试剂为四丁基氢氧化铵或四丁基溴化铵或十二烷基三甲基氯化铵，pH为4-8；更优选的，水相中缓冲盐含量为0.2wt％，离子对试剂含量为0.1wt％，pH为6.3-6.8。

紫外检测波长为210nm。

检测方法：

对照品：以Ia、Ib、Ic或Id为对照品，Ib、Ic、Id具有式(Ⅰ)所示的结构通式：

其中，M1选自Na和K中的任一种，M2选自Na、K和H中的任一种；对于Ib，M1为Na，M2为H；对于Ic，M1为K，M2为K；对于Id，M1为K，M2为H；

Ia、Ib、Ic和Id的制备方法如下：

(1)Ia的制备

富集副产物的磷酸肌酸二钠盐粗品，加甲醇超声处理两次，倾去上层，沉淀加水使溶解，再加入甲醇或乙醇，搅拌均匀，过滤，滤液于0～10℃放置结晶，再用水-甲醇或水-乙醇重结晶一次，滤出，干燥，即可得化合物Ia纯品，纯度大于98％；

(2)Ib的制备

取化合物Ia加水溶解，用1MHCl调PH至3～4，加入乙醇搅，抽滤，即得化合物Ib；

(3)Ic的制备

将由肌酐和三氯氧磷缩合反应得到的肌酐磷酰氯，边搅拌边缓慢加入到质量浓度为20％的KOH溶液中，搅拌过夜，用盐酸调PH至7～8，搅拌下加入溶液体积4倍量的乙醇，静置数小时后，抽滤，得到磷酸肌酸钾粗品，富集副产物后，加甲醇超声处理两次，倾去上层，沉淀加水使溶解，再加入甲醇或乙醇，搅拌均匀，过滤，滤液于0～10℃放置结晶，再用水-甲醇或水-乙醇重结晶一次，滤出，干燥，即得到化合物Ic纯品；

(4)Id的制备

取化合物Ic加水溶解，用1MHCl调PH至3～4，加入乙醇搅拌，抽滤，即得化合物Id。

具体检测方法一：