[发明专利]抗E-Cadherin蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞及其产生的抗E-Cadherin单克隆抗体和应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域，特别涉及抗E-Cadherin蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞及其产生的抗E-Cadherin蛋白单克隆抗体和应用。

背景技术

钙黏蛋白E(E-cadherin)是由一种肿瘤抑制基因和肿瘤转移抑制基因CDH1编码的跨膜糖蛋白家族的一员，正常表达于上皮细胞，介导Ca²⁺-依赖的细胞-细胞黏附，对维持组织结构和形态形成十分重要。相对分子质量为120kDa，由细胞外肽段、跨膜区和细胞内肽段构成，主要表达于上皮细胞膜。E-cadherin的嗜同性特异黏附作用主要是细胞间的E-连接素的胞外段共同形成“拉链”结构的黏附连接。

E-cadherin与多种上皮来源的恶性肿瘤的发生、发展、侵袭转移密切相关；其表达缺失被认为是涉及细胞-细胞黏附系统功能丧失、引起癌症浸润转移的重大分子事件之一。Zali等研究发现E-cadherin的异常表达与胃癌的恶性程度有关，在弥漫型胃癌和晚期胃癌中更为常见。Xing等通过Meta分析得出E-cadherin表达减少与胃癌患者低生存率密切相关，亚组分析表明亚洲人群中，E-cadherin的低表达对胃癌患者的总生存率有不利的影响，且与TNM分期、浸润深度、淋巴结转移、远处转移、分化程度、血管浸润及组织学类型密切相关，该分析认为E-cadherin的表达有可能作为亚洲人群中胃癌患者的预后因素。Wang等研究发现CDH1基因的C160A突变会增加胃癌、肺癌、前列腺癌和尿路上皮癌等的发病风险，但与乳腺癌、食管癌和结直肠癌的发病风险无关。Wei等报道，肝细胞癌肿瘤组织中CDHl表达上调者较表达下调或不变者更易于侵犯血管。E-cadherin表达与肺癌类型、细胞分化、分期和分级均有关系。正常支气管上皮E-cadherin表达正常，而大部分肺癌则E-cadherin表达下降，并且与细胞分化和肿瘤转移有关；另外也有研究报道有部分非小癌患者E-cadherin表达增加，提示肺癌中可能存在不同的钙粘附蛋白作用机制。

目前在临床上通常用免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)病理实验检测肿瘤组织中E-Cadherin的表达状况，其实验方法的核心为特异性结合E-Cadherin的单克隆抗体，其性能的优劣直接决定着整个检测的灵敏度和特异性。因此，研制出一种结合特异性较高的针对E-Cadherin蛋白的单克隆抗体具有重要的意义。

发明内容

有鉴于此，本发明提供抗E-Cadherin蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞及其产生的抗E-Cadherin蛋白单克隆抗体和应用。本发明所述单克隆抗体可与E-Cadherin蛋白特异性结合，而与芯片上其他近10000种其他蛋白无交叉反应，显著提高了E-Cadherin蛋白免疫检测的特异性和可靠性，广泛适用于用于各种肿瘤细胞中E-Cadherin的检测。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种单克隆抗体，其与钙黏蛋白E(E-cadherin)特异性结合。

在本发明的一些具体实施方案中，所述单克隆抗体由保藏编号为CGMCCNo.11084的杂交瘤细胞株产生。

本发明提供了所述单克隆抗体在制备用于检测钙黏蛋白E(E-cadherin)的免疫检测工具中的应用。

在本发明的一些具体实施方案中，所述免疫检测工具为试剂、试剂盒、芯片或试纸。

本发明还提供了一种免疫组化检测试剂盒，包括所述单克隆抗体。

本发明还提供了所述单克隆抗体在制备用于标记肿瘤细胞的试剂或试剂盒中的应用。

在本发明的一些具体实施方案中，所述单克隆抗体在制备用于标记肿瘤细胞的试剂或试剂盒中的应用中所述肿瘤包括乳腺癌、前列腺癌、甲状腺癌、胃癌、结直肠癌、肺癌、肝癌或肾癌中的一种或两者以上的混合物。

本发明还提供了一种标记肿瘤细胞的试剂盒，包括所述单克隆抗体。

在本发明的一些具体实施方案中，标记肿瘤细胞的试剂盒中所述肿瘤包括乳腺癌、前列腺癌、甲状腺癌、胃癌、结直肠癌、肺癌、肝癌或肾癌中的一种或两者以上的混合物。

本发明还提供了一种杂交瘤细胞株，其保藏编号为CGMCCNo.11084。