[发明专利]一种制备抗肿瘤化合物Eupenifeldin的方法及其专用菌株

说明书

本发明公开了一种制备抗肿瘤化合物Eupenifeldin的方法及其专用菌株。本发明所提供的制备抗肿瘤化合物Eupenifeldin的专用菌株具体为茎点菌(Phoma sp.)XZ068，它在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCC No.10481。实验证明，本发明利用茎点菌(Phoma sp.)XZ068CGMCC No.10481制备抗肿瘤活性化合物Eupenifeldin的方法，收率高(10.3g乙酸乙酯的粗提物经过分离纯化而得到400mg纯化合物Eupenifeldin，其纯度为99％以上，收率为3.9％)，而且本发明方法操作简单、成本低廉、省时省力。

技术领域

本发明属于生物医药领域，涉及一种制备抗肿瘤化合物Eupenifeldin的方法及其专用菌株。

背景技术

恶性肿瘤是威胁人类健康与生命的重大恶性疾病。世界卫生组织在2014年发表的《世界癌症报告》表明，2012年全世界共新增1400万癌症病例，其中有820万人死亡。同时，预测全球癌症病例将呈现迅猛增长态势，由2012年的1400万人，逐年递增至2025年的1900万人，到2035年将达到2400万人，同期癌症死亡人数也将从每年820万飙升至1300万。癌症正在成为人类的第一大杀手。经过各国科学家们多年的努力，新的抗肿瘤药物不断出现，肿瘤的化学药物治疗快速的发展。但是，对危害人类健康最严重的、占恶性肿瘤90％以上的恶性肿瘤肺癌、肝癌以及胰腺癌等还缺乏有效的治疗药物。此外，抗肿瘤药物的高昂价格、临床治疗中产生的耐药性及给患者带来的毒副作用等都表明，人类迫切需要研究与开发新型、高效、安全的抗肿瘤药物。1993年，美国百时美施贵宝公司药物研究所(PharmaceuticalResearch Institute,Bristal-Myers Squibb Company)的研究者们从真菌Eupenicilliumbrefeldianum ATCC 74184的液体发酵提取物中分离到一个具有显著肿瘤细胞毒活性的化合物，命名为Eupenifeldin[参见，Journal of Antibiotics(抗生素杂志).1993,46,1082-1088]。据报道，Eupenifeldin对人结肠癌细胞HCT116和HCT-VM46具有显著的抑制活性(IC50分别为0.16和0.002μg/mL)，并在小鼠体内的P338白血病模型中显示出抗肿瘤活性[参见，Journal of Antibiotics(抗生素杂志).1993,46,1082-1088]。另外，2008年，来自泰国国家遗传工程和生物技术中心(National Center for Genetic Engineering andBiotechnology,Thailand)的研究者们从真菌Kionochaeta ramifera BCC 7585中也分离到了Eupenifeldin[参见，Phytochemistry Letters(植物化学通讯).2008,1,204–206]。据报道，Eupenifeldin除了有抗疟疾和抗白色念珠菌的活性外，对多株肿瘤细胞系如人乳腺癌细胞(BC)，人口腔表皮样癌细胞(KB)和人肺癌细胞(NCI-H187)，都有显著的抑制活性(IC50分别为0.7,0.7和2.0μM)[参见，Phytochemistry Letters(植物化学通讯).2008,1,204–206]。由此可见，化合物Eupenifeldin具有潜在抗癌作用，但是到目前为止一直没有人能成功研究和开发该化合物，也没有研究者进一步进行抗癌机理的深入研究。因此，寻找能够大量合成抗肿瘤化合物Eupenifeldin的菌株，并开发大量制备Eupenifeldin的方法，是研究其抗癌机理和评价其能否成为新抗癌药物的首要条件。

发明内容

本发明的目的是提供一种制备抗肿瘤化合物Eupenifeldin的方法及其专用菌株。