[发明专利]基于核酸适配体特异性检测四环素的生物传感器及其制备方法

权利要求书

1.一种基于核酸适配体特异性检测四环素的生物传感器，其特征在于，该生物传感器的丝网印刷电极的工作电极上依次修饰四氧化三铁/还原氧化石墨烯‐海藻酸钠复合物层和四环素核酸适配体层。

2.根据权利要求1所述的生物传感器，其特征是，所述的依次修饰，具体包括以下步骤：

1)将四氧化三铁/还原氧化石墨烯超声分散在海藻酸钠水溶液中，得到均一的四氧化三铁/还原氧化石墨烯‐海藻酸钠复合物；

2)将四氧化三铁/还原氧化石墨烯‐海藻酸钠复合物修饰到丝网印刷电极的工作电极表面，室温下干燥成膜；

3)将四环素核酸适配体涂布在修饰有四氧化三铁/还原氧化石墨烯‐海藻酸钠复合物的工作电极表面，室温下干燥成膜后清洗即得。

3.根据权利要求2所述的生物传感器，其特征是，所述的四环素核酸适配体，即76‐mer的核苷酸序列如SeqIDNo.1所示，具体为：

5′‐CGTACGGAATTCGCTAGCCCCCCGGCAGGCCACGGCTTGGGTTGGTCCCACTGCGCGTGGATCCGAGCTCCACGTG‐3′。

4.根据权利要求2所述的生物传感器，其特征是，所述的四氧化三铁/还原氧化石墨烯，即掺杂四氧化三铁的还原氧化石墨烯。

5.根据权利要求2或4所述的生物传感器，其特征是，所述的四氧化三铁/还原氧化石墨烯，通过以下方式得到：

1.1)将氧化石墨烯、表面活性剂P123和/或F127，超声分散到溶剂中；

1.2)将可溶性铁盐和可溶性有机盐加入到上述溶液中，充分搅拌均匀后得到；

所述的溶剂为乙二醇、乙醇和水中的至少一种；

所述的可溶性铁盐为氯化铁、硝酸铁、硫酸铁中的一种或几种混合；

所述的可溶性有机盐为乙酸钠和/或乙酸钾。

6.一种根据上述任一权利要求中所述的生物传感器的四环素检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)将生物传感器在不同浓度待检测四环素溶液中孵育清洗；

2)以四环素核酸适配体修饰电极作为工作电极，碳电极为对电极，Ag/AgCl电极为参比电极，组成三电极体系；

3)将三电极体系置于含有1.0mmol/L硫堇的0.1mol/L、pH6.0醋酸盐缓冲液中，采用差分脉冲伏安法检测生物传感器在四环素溶液中孵育前后电化学信号的变化，即实现四环素的检测。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征是，所述的差分脉冲伏安法中，电位设置为–0.5V到–0.1V，脉冲宽度为0.05V，扫描速率为0.5s。