[发明专利]一种适合全自动生化分析仪的血清铜检测试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及血清铜检测技术领域，特别涉及一种适合全自动生化分析仪的血清铜检测试剂。

背景技术

铜是人体必需的微量元素之一，正常成人体内铜含量为80~150mg，血循环铜占铜总的10%。血浆中约95%的铜与α₂球蛋白牢固结合，称为铜蓝蛋白（Ceruloplasmin），其余5%为游离铜或与白蛋白结合。铜是许多酶的重要组成成分，在中枢神经系统中具有重要作用。它可以和蛋白质结合形成铜蛋白，具有保护细胞的功能，铜还是某些酶的组成部分或激活剂。与白蛋白疏松结合的铜是运输、吸收、排泄的重要形式和中间环节，也是合成各种细胞蛋白的原料。铜参与造血过程，主要影响铁的吸收、运输和利用。铜主要在小肠上段吸收，随胆汁排泄，肝脏是铜代谢的中心。

铜含量异常通常与疾病相关。心脑血管疾病、血液病（如淋巴瘤、霍奇金病等）、恶性肿瘤和肝胆系统疾病均会导致血清铜含量升高。血清铜含量低常见为营养贫血、婴儿营养不良等疾病。

临床上常用的铜检测方法有原子吸收分光光度法和比色法。

1.原子吸收分光光度法

血清用去离子水等量稀释，吸入原子化器，铜在高温下离解成铜原子蒸汽。在铜的空心阴极灯发射的324.5nm谱线中，部分发射光被蒸汽中的基态铜原子吸收，光的吸收量与火焰中铜离子的浓度成正比。该方法特异性好，灵敏度高，检测结果准确可靠，但由于原子吸收光谱仪价格昂贵，无法在临床上普及使用。

2.化学比色法

用稀盐酸使血清中与蛋白质相结合的铜游离出来，再用三氯醋酸沉淀蛋白质，滤液中的铜离子与双环己酮草酰二腙(dicyclohexanoneoxalydihydrazone)反应，生成稳定的蓝色化合物，与同样处理的标准液比较，即可求得血清铜含量。该方法操作简便，试剂易得，临床使用较多，但该方法并不适应全自动生化分析仪。

3.直接光度法

血清铜在试剂R1中的铜解离剂和非离子表面活性剂的作用下从血清蛋白质中快速裂解开来。Cu2+在pH4.0HAc-NaAc缓冲液中与试剂R2中的3,5-二溴-2-吡啶偶氮形成稳定的络合物，吸光度最大且恒定。该方法简单实用，检测结果准确，检测范围广，适合全自动生化分析仪。

鉴于此，本发明在在苦味酸法的基础上，优化反应体系，添加多种抗干扰物质和稳定剂，显著改善了试剂的抗干扰能力。

发明内容

为了克服以上问题，本发明提供了一种适合与全自动生化分析仪配套使用的血清铜检测试剂盒，该试剂盒与常规的试剂盒相比，使用简单、方便，具有很好的准确度、重复性及良好的检测范围，有利于试剂在临床上的推广应用。

基本原理

血清铜在试剂R1中的铜解离剂和非离子表面活性剂的作用下从血清蛋白质中快速裂解开来。Cu²⁺在pH4.0HAc-NaAc缓冲液中与试剂R2中的3,5-二溴-2-吡啶偶氮形成稳定的络合物。

本发明是通过以下步骤得到的：

一种适合全自动生化分析仪的血清铜检测试剂盒，由R1、R2双试剂组成。其特征在于：

R1：

过氧化氢1.0%

吐温-800.5%

聚乙二醇辛基苯基醚0.1%

聚氧乙烯异辛基苯基醚0.3%

二乙胺0.5%

叠氮钠0.5g/L

醋酸-醋酸钠缓冲液pH4.0

R2：

3,5-idBr-PADAP2.5g/L

醋酸-醋酸钠缓冲液pH4.0。

一种适合全自动生化分析仪的血清铜检测试剂盒，所述试剂R1和试剂R2在使用时的比例为R1：R2=200：50。

一种适合全自动生化分析仪的血清铜检测试剂盒，所述的非离子表面活性剂为聚乙二醇辛基苯基醚、聚氧乙烯异辛基苯基醚和吐温-80。

根据所述的，该试剂适用于多种全自动生化分析仪。

一种适合全自动生化分析仪的血清铜检测试剂盒，所述的一种防腐剂是NaN₃和二乙胺。

本发明的有益效果是：

（1）本发明选择直接光度法设计试剂配方用于检测血清铜，该试剂适用于多种全自动生化分析仪；

（2）本发明使用了三种非离子表面活性剂，分别是聚乙二醇辛基苯基醚、聚氧乙烯异辛基苯基醚和吐温-80，保证了Cu²⁺与3,5-idBr-PADAP结合形成的络合物的稳定性。

附图说明