[发明专利]四环素诱导型人工MicroRNA元件

说明书

本发明公开了一种四环素诱导型人工MicroRNA元件，其核苷酸序列如SEQ NO:1或SEQ NO:2所示。人工MicroRNA元件可以针对不同的膀胱癌细胞系的靶向基因，如β‑catenin基因，此时，序列如SEQ NO：1所示；也可以如HIF‑1α基因，此时，序列如SEQ NO：2所示。该人工元件可以有效抑制膀胱癌细胞系中靶向基因的表达，可以有效抑制膀胱癌细胞的增殖，促进膀胱癌细胞的凋亡，抑制膀胱癌细胞的迁移，从而为治疗膀胱癌提供了可能性。

技术领域

本申请涉及膀胱癌检测治疗领域。

背景技术

RNA干扰(RNA interference，RNAi)被誉为20世纪十大科学发现之一，是由微RNA(microRNA)诱导的同源mRNA的降解过程，可使基因表达受到抑制。基于微RNA的RNA干扰治疗可能会是一种更加安全有效的肿瘤治疗手段。但是，使用天然的微RNA容易出现靶基因有限、体内易降解、药效时间短、易引发干扰素反应等缺点。

人工microRNA是以天然microRNA前体短发夹结构为基本骨架，将天然microiRNA的功能序列替换为人工设计的靶向基因的反义序列，而得到的与天然microRNA具有相同结构、但与天然microRNA靶向序列完全无关的人工microRNA。人工microRNA通常由表达性载体经过转录和加工生成，其生成机制和作用途径与天然microRNA相同。相对于天然microRNA，人工microRNA具有表达成本低、干扰效率高、持续时间长和毒性低等优点。四环素开关系统基因表达系统是新近发展起来的高效、无毒、具有严密开关功能的基因表达系统，自推出以来，在很多方面得到了广泛的应用，尤其是在基因的表达调控及基因治疗上。

随着合成生物学这一新兴学科的迅猛发展，以及合成生物学的工程原理与技术的不断成熟，从而使开展高效的、定量可控的RNA干扰肿瘤治疗成为可能。

发明内容

本发明提供一种新的人工MicroRNA元件。

本发明提供一种四环素诱导型人工MicroRNA元件，其核苷酸序列如SEQ NO:1或SEQ NO:2所示。

人工MicroRNA元件可以针对不同的膀胱癌细胞系的靶向基因，如β-catenin基因，此时，序列如SEQ NO：1所示；也可以如HIF-1α基因，此时，序列如SEQ NO：2所示。

一种所述的元件在制备抑制膀胱癌细胞系中β-catenin基因表达的试剂中的应用，所述核苷酸序列如SEQ NO:1所示。

一种所述的元件在制备抑制膀胱癌细胞系中HIF-1α基因表达的试剂中的应用，所述核苷酸序列如SEQ NO:2所示。

靶向基因在膀胱癌细胞系中高表达，通过上述人工元件，可以有效抑制该靶向基因的表达。

一种所述的元件在制备抑制膀胱癌细胞迁移的药物中的应用。

所述膀胱癌细胞为T24和5637。

一种所述的元件在制备促进膀胱癌细胞凋亡的药物中的应用。

一种非治疗方法的促进膀胱癌细胞凋亡的方法，用所述的元件转染所述膀胱癌细胞。

一种所述的元件在制备治疗膀胱癌的药物中的应用。

一种所述的元件在膀胱癌细胞中调控靶向基因表达的应用。

所述靶向基因是HIF-1α基因和β-catenin基因。

本发明的有益效果是：该人工元件可以有效抑制膀胱癌细胞系中靶向基因的表达，可以有效抑制膀胱癌细胞的增殖，促进膀胱癌细胞的凋亡，抑制膀胱癌细胞的迁移，从而为治疗膀胱癌提供了可能性。

附图说明

图1是本实施方式四环素诱导型人工MicroRNA元件的构建示意图；