[发明专利]中国南瓜白粉病分子标记与鉴定中国南瓜白粉病抗性性状的引物对有效

专利信息
申请号: 201510689384.7 申请日: 2015-10-21
公开(公告)号: CN106609297B 公开(公告)日: 2019-12-31
发明(设计)人: 张国裕;李海真;张帆;贾长才;姜立纲 申请(专利权)人: 北京市农林科学院
主分类号: C12Q1/6895 分类号: C12Q1/6895;C12N15/11
代理公司: 11245 北京纪凯知识产权代理有限公司 代理人: 关畅;任凤华
地址: 10009*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 中国 南瓜 白粉病 分子 标记 鉴定 抗性 性状 引物
【权利要求书】:

1.中国南瓜白粉病分子标记,为以中国南瓜的基因组DNA为模板,采用引物对A1进行扩增得到的DNA分子;所述A1由名称为P1和P2的单链DNA组成,所述P1为与SEQ ID No.1的第65位上游特异结合的单链DNA,所述P2为与SEQ ID No.1的第82位下游特异结合的单链DNA。

2.根据权利要求1所述的中国南瓜白粉病分子标记,其特征在于:所述中国南瓜分子标记的多态性为中国南瓜基因组中含有或缺失SEQ ID No.1第65-82位。

3.根据权利要求1所述的中国南瓜白粉病分子标记,其特征在于:所述P1为SEQ IDNo.1的第1-20位所示的单链DNA,所述P2为与SEQ ID No.1的第171-191位反向互补的单链DNA。

4.鉴定中国南瓜基因型的方法,所述基因型为RR基因型、RS基因型和SS基因型,所述方法包括如下K1)和K2):

K1)以待测中国南瓜基因组DNA为模板,采用权利要求1-3中任一所述A1进行PCR扩增得到PCR产物;

K2)检测步骤K1)得到的PCR产物,根据所述PCR产物确定中国南瓜基因型:

所述PCR产物为2条均不含有SEQ ID No.1的第65-82位所示的DNA片段,则所述待测中国南瓜的基因型为RR基因型;所述PCR产物为仅一条含有SEQ ID No.1的第65-82位所示的DNA片段,则所述待测中国南瓜的基因型为RS基因型;所述PCR产物为2条均含有SEQ IDNo.1的第65-82位所示的DNA片段,则所述待测中国南瓜的基因型为SS基因型。

5.鉴定中国南瓜基因型的方法,所述基因型为RR基因型、RS基因型和SS基因型,所述方法包括如下L1)和L2):

L1)以待测中国南瓜基因组DNA为模板,采用权利要求3中所述A1进行PCR扩增得到PCR产物;

L2)下述L21)或L22):

L21)检测步骤L1)得到的PCR产物的大小,根据所述PCR产物的大小确定中国南瓜基因型:

所述PCR产物含有191bp和173bp的DNA片段的所述待测中国南瓜的基因型为RS基因型;所述PCR产物含有191bp的DNA片段、不含有173bp的DNA片段的所述待测中国南瓜的基因型为SS基因型;所述PCR产物不含有191bp的DNA片段、含有173bp的DNA片段的所述待测中国南瓜的基因型为RR基因型;

L22)检测步骤L1)得到的PCR产物的序列,根据所述PCR产物确定中国南瓜基因型:

所述PCR产物含有SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示的DNA片段的所述待测中国南瓜的基因型为RS基因型;所述PCR产物含有SEQ ID No.2所示的DNA片段、不含SEQ ID No.1所示的的DNA片段,所述待测中国南瓜的基因型为RR基因型;所述PCR产物含有SEQ ID No.1所示的DNA片段、不含SEQ ID No.2所示的的DNA片段,所述待测中国南瓜的基因型为SS基因型。

6.鉴定或辅助鉴定中国南瓜白粉病抗性性状的方法包括如下M1)和M2):

M1)以待测中国南瓜基因组DNA为模板,采用权利要求1-3中任一所述A1进行PCR扩增得到PCR产物;

M2)检测步骤M1)得到的PCR产物,如果所述PCR产物为仅1条含有SEQ ID No.1的第65-82位所示的DNA片段,则所述待测中国南瓜为或候选为抗白粉病中国南瓜;如果所述PCR产物为2条均不含有SEQ ID No.1的第65-82位所示的DNA片段,所述待测中国南瓜为或候选为抗白粉病中国南瓜;如果所述PCR产物为2条均含有SEQ ID No.1的第65-82位所示的DNA片段,所述待测中国南瓜为或候选为非抗白粉病中国南瓜。

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