[发明专利]金黄色葡萄球菌TRAP蛋白的CD4+T细胞表位鉴定及其重组表位疫苗

说明书

本发明涉及金黄色葡萄球菌TRAP蛋白的CD4⁺T细胞表位，氨基酸序列如SEQ NO:1和SEQ NO:2所示。该表位产生了较强的TRAP抗原特异性的CD4⁺T细胞增值，同时分泌了高水平的细胞因子IFN‑γ和IL‑17，暗示筛选的两个TRAP优势表位属于Th1和Th17型，且SEQ NO:2特异性CD4⁺T细胞分泌的IL‑17高于TRAP全蛋白。本发明还提供了两种TRAP蛋白的CD4⁺T细胞表位和TRAP蛋白的B细胞表位串联而成的重组表位疫苗PT，该疫苗产生了特异性的细胞免疫应答和体液免疫应答，且对于金黄色葡萄球菌感染的保护效果高于TRAP全蛋白，因此该表位可应用于金黄色葡萄球菌疫苗的开发。

技术领域

本发明属于分子生物学和免疫学领域，涉及一种金黄色葡萄球菌TRAP蛋白的 CD4⁺T细胞表位鉴定及其重组表位疫苗，能够引起小鼠的特异性细胞免疫应答和体液免疫应答，并对金黄色葡萄球菌感染具有良好的免疫预防作用。

背景技术

金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)是一种常见的革兰氏阳性条件致病菌，可引起人的毒素性疾病、化脓性疾病、肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等，严重者可致败血症、脓毒症等全身性感染。S.aureus也可引起动物感染，尤其是奶牛乳房炎的重要病原菌。目前，全世界每年有几百万S.aureus感染的报道，对于S.aureus感染的治疗主要依赖抗生素。虽然过去抗生素在治疗和控制S.aureus感染方面发挥了重要作用，但由于抗生素的普遍和大量使用导致了耐药菌株出现，目前临床上耐药S.aureus 引发的感染已成为难以解决的棘手问题。因此，寻找一种抗S.aureus感染的新方法至关重要，而使用免疫制剂-疫苗是防治S.aureus感染一种理想途径。目前为止，所研究的S.aureus疫苗保护效果均不够理想，其主要原因之一是在过去的疫苗研究中只考虑了体液免疫应答作用而忽视了以CD4⁺T细胞为主的细胞免疫应答，特别是Th1和Th17 细胞免疫应答的作用。

TRAP(target of RNAIII activating protein)是一种葡萄球菌中高度保守的蛋白，由 167个氨基酸组成，在DNA抗氧化损伤中发挥重要作用。免疫研究表明，TRAP蛋白免疫小鼠和牛均获得良好的保护效果，由此说明TRAP是一个良好的S.aureus疫苗的候选抗原。但TRAP蛋白的CD4⁺T细胞表位在诱导特异性免疫应答中的作用及其制备的表位疫苗诱导的免疫保护作用未不清楚。因此，我们对S.aureus TRAP蛋白CD4⁺T 细胞表位进行了鉴定，并将其与TRAP蛋白的B细胞表位制备成重组表位疫苗，我们的研究表明CD4⁺T细胞表位和B细胞表位能够在小鼠体内引起特异性细胞免疫应答和体液免疫应答，有助于抵抗S.aureus的感染，有利于进一步开发S.aureus疫苗。

发明内容

本发明的第一目的是提供一种金黄色葡萄球菌TRAP蛋白的CD4⁺T细胞表位。

本发明的第二目的是提供另一种金黄色葡萄球菌TRAP蛋白的CD4⁺T细胞表位。

本发明的第三目的是提供上述两种金黄色葡萄球菌TRAP蛋白的CD4⁺T细胞表位与TRAP蛋白的B细胞表位串联而成的重组表位疫苗PT。

本发明通过以下技术方案来实现：

一、一种金黄色葡萄球菌TRAP蛋白的CD4⁺ T细胞表位，其氨基酸序列如SEQ NO:1所示。

上述的金黄色葡萄球菌TRAP蛋白的CD4⁺T细胞表位在制备治疗金黄色葡萄球菌感染的疫苗中的应用。

二、一种金黄色葡萄球菌TRAP蛋白的CD4⁺ T细胞表位，其氨基酸序列如SEQ NO:2所示。