[发明专利]一种热带普通野生稻幼穗诱导愈伤组织培养基

说明书

技术领域

本发明涉及稻种资源学科野生稻种组织培养技术领域，特别是一种热带普通野生稻幼穗诱导愈伤组织培养基。

背景技术

普通野生稻是我们国家仅有的三种野生稻资源之一。它具有许多优良的农艺性状，如抗寒、抗虫害、抗纹枯病和白叶枯病等特性，是一种十分宝贵的遗传资源，在栽培稻的育种中有着十分广阔的应用前景

随着现代育种工作和生物技术的发展，人们开展了对野生稻体细胞遗传的研究。不同产地的普通野生稻已在花药、幼穗和种子诱导培养的研究中获得再生植株，但愈伤组织的诱导率和绿苗分化率较低。不利于在单个细胞、组织和器官水平上的遗传操作和种质保存。

广西地处祖国南方位于北亚热带地区，采集来自热带地区的普通野生稻，因其耐冷性能比亚热带地区的普通野生稻差，经常出现田间越冬死亡的现象，极其容易造成种质资源丢失。

发明内容

本发明的目的在于提供一种热带普通野生稻幼穗诱导愈伤组织培养基，以解决普通野生稻田间越冬死亡的问题。

为实现上述技术目的，达到上述技术效果，本发明公开了一种热带普通野生稻幼穗诱导愈伤组织培养基，培养基按照以下组分及含量配制而成：

(1)大量元素：硝酸钾1900±60mg/L、硝酸铵1450±50mg/L、七水硫酸镁350±20mg/L、磷酸二氢钾400±30mg/L、氯化钙200±20mg/L；

(2)微量元素：一水硫酸锰22.3±5mg/L、七水硫酸锌4.3±2mg/L、硼酸1.6±0.5mg/L、二水钼酸钠0.025±0.005mg/L、五水硫酸铜0.025±0.005mg/L、六水氯化钴0.025±0.005mg/L、七水硫酸亚铁86.2±11.5mg/L、碘化钾0.8±0.1mg/L；

(3)有机物：甘氨酸2.0±0.5mg/L、谷氨酸2.0±0.5mg/L、盐酸硫胺素0.5±0.05mg/L、盐酸吡哆醇0.5±0.05mg/L、烟酸0.5±0.05mg/L、肌醇100.0±20mg/L、水解乳蛋白650±40mg/L、酵母浸提物1000±50mg/L、蔗糖60±10mg/L、琼脂9±1mg/L；

(4)植物生长调节剂：2.4-D4.0±0.5mg/L、吲哚乙酸1.0±0.05mg/L；

余量为蒸馏水，调节pH为5.8。

优选的，还包括了野生稻幼穗细胞裂解液25.0±5ml/L，野生稻幼穗细胞裂解液制备方法为25g野生稻幼穗新芽液氮研磨或超声破碎后，滤去残渣，灭菌，稀释到1L无菌水。

本发明具有以下有益效果：

1.本发明通过优化传统愈伤组织培养基，通过对培养基中各组分含量进行合理调整，可以满足野生稻幼穗愈伤组织生长需求为后期野生稻幼穗越冬御寒奠定基础。

2.在经过合理的培养基中添加了野生稻幼穗新芽细胞裂解液，细胞裂解液不仅可以提供愈伤组织初期生长所需的各种生长因子，而且提供了类似细胞生长所需生理环境，使愈伤组织更好的生长。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。

实施例1

一种热带普通野生稻幼穗诱导愈伤组织培养基，培养基按照以下组分及含量配制而成：

(1)大量元素：硝酸钾1840mg/L、硝酸铵1400mg/L、七水硫酸镁330mg/L、磷酸二氢钾370mg/L、氯化钙180mg/L；

(2)微量元素：一水硫酸锰17.3mg/L、七水硫酸锌2.3mg/L、硼酸1.1mg/L、二水钼酸钠0.02mg/L、五水硫酸铜0.02mg/L、六水氯化钴0.02mg/L、七水硫酸亚铁74.7mg/L、碘化钾0.7mg/L；

(3)有机物：甘氨酸1.5mg/L、谷氨酸1.5mg/L、盐酸硫胺素0.45±mg/L、盐酸吡哆醇0.45mg/L、烟酸0.45mg/L、肌醇80.0mg/L、水解乳蛋白610mg/L、酵母浸提物950mg/L、蔗糖50mg/L、琼脂8mg/L；

(4)植物生长调节剂：2.4-D3.5mg/L、吲哚乙酸0.95mg/L；

(5)野生稻幼穗细胞裂解液20ml/L；

余量为蒸馏水，调节pH为5.8。

诱导培养幼穗324枚培养结果：