[发明专利]专能细胞群的生产和使用方法

权利要求书

1.一种用于产生分化细胞群的方法，所述方法包括：

选择非多能、非自我更新的细胞；

在所选择的细胞中过表达或导入PRR+Numb、OCT3/4和Sox2；

在包含对所选择的细胞和/或它们的后代以第一生长速率生长有效的细胞因子的生长培养基中培养所述选择的细胞和/或它们的后代，其中所述速率取决于在所述生长培养基中所选择的细胞的倍增时间，以及在这些培养条件下保持所述细胞直到到达所要的细胞数，其中所述细胞因子选自EGF、碱性成纤维细胞生长因子bFGF、白血病抑制因子LIF、Steel因子、IL-6、超IL-6、IL-7、抑瘤素-M、心肌营养素-1；

在对所选择的细胞和/或它们的后代在分化培养基中以第二生长速率生长有效的分化培养基中培养所述选择的细胞和/或它们的后代，其中所述第二生长速率取决于在所述分化培养基中所选择的细胞的倍增时间，并且其中所述第二生长速率是小于所述第一生长速率的生长速率；所述分化培养基包含至少一种分化剂；

从而产生所述分化细胞群。

2.如权利要求1所述的方法，其中所述选择的细胞通过诱导基因表达模式永久改变的细胞培养条件而被基因修饰，或通过被导入至所述选择的细胞或它们的后代中的天然核酸或合成核酸或蛋白而被基因修饰。

3.如权利要求2所述的方法，所述方法包括用治疗载体转染，所述治疗载体包含：具有降低病毒感染细胞、转录病毒DNA的能力的有益序列，或使转染或感染的细胞不能维持HIV复制和转录的有益序列。

4.如权利要求2所述的方法，所述方法包括用治疗载体转染，所述治疗载体包含：有商业用途的脱氧核糖核酸(DNA)或核糖核酸(RNA)序列。

5.如权利要求4所述的方法，所述有商业用途的脱氧核糖核酸(DNA)或核糖核酸(RNA)序列包括合成寡核苷酸。

6.如权利要求4所述的方法，所述有商业用途的核糖核酸(RNA)序列包括siRNA、shRNA。

7.如权利要求4所述的方法，所述有商业用途的核糖核酸(RNA)序列包括反义RNA。

8.如权利要求4所述的方法，所述有商业用途的核糖核酸(RNA)序列包括微型RNA。

9.如权利要求2所述的方法，所述方法包括用治疗载体转染，所述治疗载体包含：编码选自天冬氨酸酰酶(ASP)、氨基己糖苷酶A(HEXA)、氨基己糖苷酶B(HEXB)、HRPT、HTT、半乳糖苷酶α(GLA)、葡糖苷酶β酸(GBA)、冯希佩尔林道肿瘤抑制子(VHL)、β球蛋白(HBB)、NPC1、或PARK254的蛋白的核酸序列。

10.如权利要求3-9中任一项所述的方法，其中所述治疗载体能够延缓HIV-1和/或HIV-2感染。

11.如权利要求1所述的方法，其中所述选择的细胞包括针对HLA类型筛选的细胞。

12.如权利要求1所述的方法，所述方法还包括改变端粒酶产生。

13.如权利要求1所述的方法，其中所述细胞在三维支架或二维支架中培养，所述细胞在去细胞化的器官中或去细胞化的组织上生长，或所述细胞与喷墨打印技术结合以进行组织工程的应用。

14.如权利要求1所述的方法，其中所述过表达或导入步骤包括转染步骤，并且其中所述转染步骤包括使用电穿孔、纳米囊、纳米穹隆体和脂质体中的一种或更多种，或包括避免对所述选择的细胞的基因组进行逆转录病毒整合/慢病毒整合或其他随机改变的其他手段。