[发明专利]一种桑葚酒渣中矢车菊素花色苷的提取方法

权利要求书

1.一种桑葚酒渣中矢车菊素花色苷的提取方法，其特征在于，它包括如下步骤：

(1)取压榨分离的桑葚酒渣，于35～55℃烘24h以去除挥发酸，-18℃下冷冻至水分含量5％以下，解冻后粉碎成粉料，于4℃下密封避光保存，待用；

(2)将步骤(1)得到的桑葚酒渣粉料加入5～10倍重量的85％(v/v)乙醇水溶液中，在35～50℃下浸泡4h，离心，取上清液浓缩后得到桑葚酒渣花色苷的乙醇提取物浸膏；

(3)将步骤(2)得到的桑葚酒渣花色苷的乙醇提取物浸膏溶于蒸馏水中，得到桑葚花色苷粗提物水溶液；

(4)将步骤(3)得到的粗提物水溶液过HPD700型大孔吸附树脂柱，充分吸附后，先用蒸馏水洗杂，再用体积百分浓度为40～60％的乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液浓缩至0.1～0.2倍体积，浓缩液用乙酸乙酯萃取，重复萃取3次，合并水相，将水相真空旋转蒸发浓缩至无水排出，得到花色苷提取物浸膏；

(5)将步骤(4)得到的花色苷提取物浸膏用体积百分浓度为0.1～0.5％的乙酸水溶液溶解，过SephadexLH-20凝胶柱，用甲醇、蒸馏水和甲酸进行阶段梯度洗脱，甲醇、蒸馏水和甲酸的三个梯度分别为体积比95∶4∶1、90∶9∶1和80∶19∶1，三个梯度分别洗脱30min，收集90∶9∶1的洗脱部分，进行浓缩后冷冻干燥，将冻干粉用体积百分浓度为0.1～0.5％的乙酸水溶液溶解，过SephadexLH-20凝胶柱，然后用甲醇、蒸馏水和甲酸进行线性梯度洗脱，甲醇、蒸馏水和甲酸的体积比由95∶4∶1线性均匀变化到90∶9∶1，线性均匀变化的时间为30min，变化至90∶9∶1后再维持30min，收集洗脱峰，进行浓缩后冷冻干燥即为桑葚矢车菊素花色苷样品。

2.根据权利要求1所述的桑葚酒渣中花色苷的提取方法，其特征在于，步骤(1)中，所述的粉料粒径为40～100目。

3.根据权利要求1所述的桑葚酒渣中花色苷的提取方法，其特征在于，步骤(2)中，浓缩温度为40～50℃。

4.根据权利要求1所述的桑葚酒渣中花色苷的提取方法，其特征在于，步骤(3)中，对于1L蒸馏水，桑葚酒渣中花色苷的乙醇提取物浸膏的加入质量为200～600g。

5.根据权利要求1所述的桑葚酒渣中花色苷的提取方法，其特征在于，步骤(4)中，每次萃取，乙酸乙酯的使用体积为浓缩液体积的2～6倍。

6.根据权利要求1所述的桑葚酒渣中花色苷的提取方法，其特征在于，步骤(4)中，真空旋转蒸发浓缩的温度为40～50℃。

7.根据权利要求1所述的桑葚酒渣中花色苷的提取方法，其特征在于，步骤(5)中，对于每10g花色苷提取物浸膏，乙酸水溶液的加入体积为5～8mL。

8.根据权利要求1所述的桑葚酒渣中花色苷的提取方法，其特征在于，步骤(5)中，所述的浓缩后冷冻干燥，浓缩温度为40～50℃，冷冻干燥温度为-50℃～-80℃。

9.根据权利要求1所述的桑葚酒渣中花色苷的提取方法，其特征在于，步骤(5)中，对于每1g冻干粉，乙酸水溶液的加入体积为10～15mL。