[发明专利]改变细胞命运的方法有效
| 申请号: | 201510666546.5 | 申请日: | 2015-10-14 |
| 公开(公告)号: | CN105483157B | 公开(公告)日: | 2020-01-03 |
| 发明(设计)人: | 刘兴国;应仲富;郑玲君;陈可实 | 申请(专利权)人: | 中国科学院广州生物医药与健康研究院 |
| 主分类号: | C12N15/867 | 分类号: | C12N15/867;C12N5/071;C12N5/10 |
| 代理公司: | 11201 北京清亦华知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人: | 李志东 |
| 地址: | 510530 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 改变 细胞 命运 方法 | ||
1.一种促进细胞的重编程的方法,其特征在于,包括:
诱导细胞发生线粒体炫,所述细胞为体细胞,所述体细胞过表达Sox2、Klf4、Oct4和c-Myc;
所述诱导细胞发生线粒体炫是通过下列至少之一实现的:
使所述细胞与百草枯接触;
使所述细胞与黄蜂毒素接触;以及
使所述细胞过表达亲环素D。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,通过将表达载体引入所述细胞中以便过表达所述亲环素D,其中,所述表达载体携带SEQ ID NO:1所示核苷酸序列,
任选地,所述表达载体独立地选自逆转录病毒载体、慢病毒载体的至少之一。
3.诱导细胞发生线粒体炫的试剂在促进细胞的重编程中的用途,所述细胞为体细胞,所述体细胞过表达Sox2、Klf4、Oct4和c-Myc;
所述诱导细胞发生线粒体炫的试剂包括选自下列的至少之一:
百草枯;
黄蜂毒素;以及
适于使所述细胞过表达亲环素D的试剂。
4.根据权利要求3所述的用途,其特征在于,所述适于使所述细胞过表达亲环素D的试剂包括表达载体,其中,所述表达载体携带SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列,
任选地,所述表达载体独立地选自逆转录病毒载体、慢病毒载体的至少之一。
5.诱导细胞发生线粒体炫的试剂在制备用于促进细胞的重编程的试剂盒中的用途,所述细胞为体细胞,所述诱导细胞发生线粒体炫的试剂包括选自下列的至少之一:
百草枯;
黄蜂毒素;以及
适于使所述细胞过表达亲环素D的试剂。
6.根据权利要求5所述的用途,其特征在于,所述适于使所述细胞过表达亲环素D的试剂包括表达载体,其中,所述表达载体携带SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列,
任选地,所述表达载体独立地选自逆转录病毒载体、慢病毒载体的至少之一。
7.根据权利要求5所述的用途,其特征在于,进一步包括:
适于使所述细胞过表达Sox2、Klf4、Oct4和c-Myc的试剂,
任选地,所述适于使所述细胞过表达Sox2、Klf4、Oct4和c-Myc的试剂包括表达载体,所述表达载体携带Sox2、Klf4、Oct4和c-Myc核苷酸序列的至少之一,
任选地,所述表达载体独立地选自逆转录病毒载体、慢病毒载体的至少之一。
8.适于诱导细胞发生线粒体炫的试剂在制备促进细胞的重编程的培养基中的用途,所述培养基包括基础培养基,所述细胞为体细胞,所述体细胞过表达Sox2、Klf4、Oct4和c-Myc,
所述适于诱导细胞发生线粒体炫的试剂包括选自下列的至少之一:
百草枯;
黄蜂毒素;以及
适于使所述细胞过表达亲环素D的病毒,所述病毒携带表达载体,所述表达载体携带SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。
9.根据权利要求8所述的用途,其特征在于,所述病毒独立地选自逆转录病毒、慢病毒的至少之一,
任选地,所述表达载体独立地选自逆转录病毒载体、慢病毒载体的至少之一,
任选地,所述百草枯的浓度是1微摩尔/升,
所述黄蜂毒素的浓度是5微摩尔/升,
所述病毒的感染复数为6。
10.一种促进细胞Nanog基因启动子去甲基化水平的方法,其特征在于,包括:
诱导细胞发生线粒体炫,所述细胞为体细胞,所述体细胞过表达Sox2、Klf4、Oct4和c-Myc,
所述诱导细胞发生线粒体炫是通过下列至少之一实现的:
使所述细胞与百草枯接触;
使所述细胞与黄蜂毒素接触;以及
使所述细胞过表达亲环素D。
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