[发明专利]一种注射用特利加压素的有关物质分析方法

说明书

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种注射用特利加压素的有关物质分析方法。

背景技术

注射用特利加压素的主要活性成分为特利加压素(三甘氨酸-8-赖氨酸-加压素)，为化学合成多肽类化合物。特利加压素的药理作用为：降低门静脉高压，同时减少门静脉区的血流，收缩食管平滑肌，持续压迫食管静脉曲张。注射用特利加压素的主要用于治疗食管静脉曲张出血。

多肽类化合物，是一类重要的生物活性分子。多肽等生物技术药物的研究技术，如多肽固相合成技术及高效液相色谱纯化、分析技术等的发展，使得合成多肽药物的开发也成为药物研究中的一个活跃领域。

合成多肽药物是指采用化学合成方法制备的多肽类药物。采用化学合成方法制备多肽，可以对天然多肽的结构进行修饰，从而增加多肽与受体的亲和力、选择性，增强对酶降解的抵抗力或改善药代动力学特性，甚至由受体的激动剂变为拮抗剂。

多肽主要由氨基酸(包括天然氨基酸和非天然氨基酸)构成，这使得多肽类药物在质量研究方面不同于一般药物。由于合成工艺、结构等方面的独特性，合成多肽原料药中工艺杂质的来源和一般化学药物有所不同，其可能产生的工艺杂质有：缺失肽、断裂肽、去酰胺多肽、氨基酸侧链的不完全脱保护所形成的副产物、氧化肽、二硫键交换的产物、非对映异构的多肽等。同时，由于多肽的结构特点，这类药物的稳定性相对较差，引起多肽药物不稳定的原因主要有水解、氧化、外消旋化、二硫键的断裂及重排、β消除等。因此，在合成多肽药物的有关物质检查方法的研究中需要充分考虑对工艺杂质与降解杂质的检出效能。

多肽类成分的各组成氨基酸均含有末端紫外吸收结构，因此可以使用紫外检测器进行检测。同时，由于不同结构多肽类成分疏水、亲水性质的差异，反相高效液相色谱结合梯度洗脱是多肽类成分常用的分离方法。因此，高效液相色谱-紫外检测器联用是多肽类成分杂质分析的最常用分析技术。

目前，已公开的注射用特利加压素有关物质分析方法有：德国辉凌公司德国辉凌公司注射用特利加压素质量标准(标准号：YBH02332010)和德国辉凌翰宇药业注射用特利加压素质量标准(标准号：YBH07302009)。但上述已公开分析方法对注射用特利加压素有关物质的检测效能未经过对比研究。本发明对注射用特利加压素有关物质分析方法进行了充分的研究，并通过对不同条件下强制降解样品的检测，与已公开方法进行充分对比。研究结果表明，本发明建立的有关物质分析方法对特利加压素工艺及降解杂质的检出效能更高。

发明内容

本发明的目的在于提供一种注射用特利加压素的含量检测方法。

特利加压素为多肽类药物，易发生降解、断裂，使产品不稳定，因此需要在生产过程中对产品的含量与有关物质进行及时、有效、准确的分析与测定。与现有已公开的注射用特利加压素有关物质分析方法相比较，本发明所建立的分析方法，简单易行，灵敏、准确、精密度高，对特利加压素工艺及降解杂质具有更高的检出效能，能够在大生产中应用，更为有效的控制产品质量。

本发明所述的注射用特利加压素的含量检测方法，包括以下步骤：

步骤1，供试品溶液的制备：取注射用特利加压素配制成供试品溶液；

步骤2，自身对照品溶液制备：将供试品溶液稀释，配制成自身对照品溶液；；

步骤3，有关物质的含量计算：分别将对照品溶液和供试品溶液注入高效液相色谱仪，得到色谱图，计算得到供试品溶液中有关物质含量。

其中，所述分析方法的液相色谱条件如下：

色谱柱：Agilent Poroshell 120EC-C18，规格4.6×100mm，2.7μm；

流动相A：0.1mol/L磷酸二氢钠(磷酸调pH值3.5)-乙腈，体积比：92:8；

流动相B：0.1mol/L磷酸二氢钠(磷酸调pH值3.5)-乙腈，体积比：80:20；

检测波长：210nm；

流速：1.2ml/min

柱温：40℃

梯度洗脱程序如下表所示：