[发明专利]一种SLCO1B1 521T>C的检测引物及其组合物有效
| 申请号: | 201510652715.X | 申请日: | 2015-10-10 |
| 公开(公告)号: | CN105255863B | 公开(公告)日: | 2019-08-23 |
| 发明(设计)人: | 汪大为 | 申请(专利权)人: | 北京晋祺生物科技有限公司 |
| 主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;C12Q1/6844 |
| 代理公司: | 天津协众信创知识产权代理事务所(普通合伙) 12230 | 代理人: | 刘斌 |
| 地址: | 100039 北京市海淀*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 slco1b1 521 检测 引物 及其 组合 | ||
1.一组SLCO1B1521T>C的检测引物组,其特征在于,所述检测引物组如下:
正向外侧引物F3T:SEQ ID NO:1;
反向外侧引物B3T:SEQ ID NO:2;
正向内侧引物FIPT:SEQ ID NO:3;
反向内侧引物BIPT:SEQ ID NO:4;
正向外侧引物F3C:SEQ ID NO:5;
反向外侧引物B3C:SEQ ID NO:6;
正向内侧引物FIPC:SEQ ID NO:7;
反向内侧引物BIPC:SEQ ID NO:8;
所述SEQ ID NO:1-4所示的序列是用于检测rs4149056位点的T等位基因;
所述SEQ ID NO:5-8所示的序列是用于检测rs4149056位点的C等位基因。
2.一种检测SLCO1B1基因的反应体系,其特征在于,所述反应体系包括权利要求1所述的引物组,反应缓冲液,dNTPs,羟基萘酚蓝,甜菜碱,BstDNA聚合酶,待检样品基因组DNA和去离子水。
3.根据权利要求2所述的反应体系,其特征在于,所述反应缓冲液包括Tris-HCl,KCl,(NH4)2SO4,MgSO4和Tween-20;所述Tris-HCl的浓度为10-30mM;所述KCl的浓度为10-60mM;所述(NH4)2SO4的浓度为5-13mM;所述MgSO4的浓度为2-8mM;所述Tween-20的体积分数为0.1-1%。
4.根据权利要求3所述的反应体系,其特征在于,所述Tris-HCl的浓度为20mM;所述KCl的浓度为50mM;所述(NH4)2SO4的浓度为10mM;所述MgSO4的浓度为4mM;所述Tween-20的体积分数为0.1%。
5.根据权利要求2或3所述的反应体系,其特征在于,所述dNTPs的浓度为1-2mM;所述羟基萘酚蓝的浓度为108-130μM。
6.根据权利要求2或3所述的反应体系,其特征在于,所述dNTPs的浓度为1.4mM;所述羟基萘酚蓝的浓度为120μM。
7.根据权利要求2-3中任一项所述的反应体系,其特征在于,所述甜菜碱的浓度为0.1-1M。
8.根据权利要求2-3中任一项所述的反应体系,其特征在于,所述反应体系包括反应体系T和反应体系C,其中每个25μL反应体系含有以下组分:
缓冲液:
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