[发明专利]BTRC基因的过表达试剂及其制备和应用方法

说明书

本发明公开了BTRC基因的过表达试剂及其制备和应用方法。选择pcDNA3.1空白载体构建BTRC的过表达载体，酶切pcDNA3.1载体并将BTRC序列插入，得到用于真核表达BTRC的载体质粒。本发明证实在鼻咽癌细胞株中下调BTRC基因的表达可以促进鼻咽癌细胞的侵袭转移；通过设计并构建BTRC基因的过表达载体，成功地在鼻咽癌细胞中表达BTRC基因，可以有效地抑制鼻咽癌细胞的侵袭与转移能力，为鼻咽癌治疗提供了新途径。

技术领域

本发明属于肿瘤分子生物学领域，具体涉及BTRC基因的过表达试剂及其制备和应用方法。

背景技术

鼻咽癌(Nasopharyngeal Carcinoma,NPC)是我国南方地区常见的头颈部恶性肿瘤，由鼻咽粘膜上皮发生恶性转化而来，大多数为低分化鳞状细胞癌，恶性程度高且发病部位隐蔽，特别是发生在咽隐窝和鼻咽顶部的患者早期症状不明显，因而难以早期发现，误诊误治率较高；另外鼻咽癌极易发生转移，初诊患者颈部淋巴结转移率高达80％。放射治疗是目前鼻咽癌临床上最常用的治疗手段，60～70％的患者能取得较好的疗效，但仍有20～30％的患者会出现复发和转移。复发和转移是临床上导致鼻咽癌患者死亡的主要因素之一，且放化疗对治疗鼻咽癌的复发、转移效果不理想，因此，筛选新的鼻咽癌早期转移及预后判断的分子标记物，对于鼻咽癌的临床治疗有着重要的指导意义，同时相比较传统的放化疗手段，生物治疗的方法更适合复发和转移鼻咽癌的治疗，其中基因疗法对防治鼻咽癌的复发、转移具有更重要而广阔的临床应用前景，筛选鼻咽癌基因治疗的靶点也同样意义重大。

我们通过基因芯片技术，筛选到了BTRC基因(GenebankGene ID:8945；参考序列：NM_033637.3)在鼻咽癌中表达下调。迄今为止有关BTRC与鼻咽癌发生发展中的作用的关系及其在鼻咽癌病人的早期筛查、辅助诊断或者疗效预测等方面均没有文献报道。我们通过研究表明，BTRC在鼻咽癌组织中的表达水平与鼻咽癌的侵袭转移及预后密切相关，鼻咽癌组织中BTRC基因表达水平较低的患者更容易复发和转移，因而生存时间较BTRC基因表达水平高的患者更短。表明BTRC基因可以作为鼻咽癌辅助诊断、疗效预测及预后判断等的分子标记，针对BTRC设计专用荧光实时定量PCR引物、原位杂交探针及免疫组织化学检测试剂盒等，用于检测鼻咽癌组织中BTRC的表达水平有望为临床上对鼻咽癌进行复发和转移的预测提供参考。