[发明专利]一种复合磷酸酯酶的提取和干燥方法

说明书

技术领域

本发明涉及天然产物提取，具体说是一种复合磷酸酯酶的提取和干燥方法。

技术背景

复合磷酸酯酶其主要成份含有磷酸单酯酶、磷酸二酯酶、核苷酸酶、淀粉酶等多种生物活性物质。用于治疗各类型肝炎、肝硬化、脂肪肝、银屑病等。是植物提取物科学精制而成，能促进人体正常代谢、具有磷酸酯酶活性的一种多酶制剂，能催化多种磷酸酯水解，促进或调节人体新陈代谢，有利于增进食欲，增强体质及疾病的改善或痊愈。

目前，关于复合磷酸酯的提取方面报道的文献和专利较少。中国专利CN101368176A提出了一种提取和干燥方法。大麦根须经水提后，以硫酸铵盐析，再以丙酮-水在-20℃条件下洗涤，出去产品表面的盐分。洗盐完毕的产品再以纯丙酮在-20℃洗涤，室温晾干。

此发明虽然得到了最终的产品，但是存在以下不足：

(1)以硫酸铵分级析得到产品，操作复杂且不能保证硫酸铵在复合磷酸酯酶中没有残留；

(2)使用了有机溶剂丙酮，有一定毒性并且容易造成酶活性降低；

(3)操作中有-20℃步骤，对生产条件要求高，操作不便利；

(4)最终产品是室温晾干，干燥效率低且丙酮在产品中有较多的残留；

(5)晾干过程丙酮可能会导致复合磷酸酯酶的活性降低。

张宇红、王学东等在《复合磷酸酯酶提取工艺的研究》中提到复合磷酸酯酶遇热易失活，整个工艺过程温度不高于40℃。干燥温度低从理论上讲虽然会保持复合磷酸酯酶的活性，但实际上由于在湿态下时间太长反而会导致酶活性的降低，并且降低干燥效率，延长生产周期。

发明内容

本发明目的在于提供一种复合磷酸酯酶的提取和干燥方法。

为实现上述目的，本发明采用技术方案为：

一种复合磷酸酯酶的提取方法，以大麦根须为原料，将原料经水浸泡提取、离心，收集离心液经醇沉，使复合磷酸酯酶析出；析出的复合磷酸酯酶经水溶解分散，再经喷雾干燥的方式使分散体得以干燥，进而得水分低于8％的复合磷酸酯酶。

所述复合磷酸酯酶湿品用其重量5～10倍的水溶解分散，分散后采用喷雾干燥方式进行干燥，得到水分低于8％、酶活性在每毫克4000～10000单位的复合磷酸酯酶。

喷雾干燥机进风口温度110～160℃，出风口温度70～100℃。采用喷雾干燥的方式克服了传统工艺低温干燥时间长、酶活性易下降的缺点，既保持了较高的酶活性又提高了干燥效率，在短时间内得到水分含量低于8％的产品。

将原料浸泡在其重量4～8倍的水中，室温下浸泡6～12小时，浸泡提取得到复合磷酸酯酶水溶液，离心除去大麦根。

所述复合磷酸酯酶水溶液经其体积2～5倍的醇在0℃～30℃下进行醇沉1～2小时，而后以管式离心机离心，收集沉淀复合磷酸酯酶湿品。

所述醇沉后在0℃～30℃下，以管式离心机10000～16000转/分离心1～2小时，收集沉淀复合磷酸酯酶湿品。

所述醇为乙醇，浓度为80～95％。

本发明所具有优点：

本发明生产条件温和，提取和干燥周期短，只使用了乙醇为溶剂且可回收套用，工艺绿色环保，克服了其他专利方法中操作复杂、对生产条件要求高、干燥时间长等缺点。特别是采用了喷雾干燥的方式，克服了传统方法中低温或者室温干燥效率低、时间长的缺点，在缩短了干燥时间的同时很好的保持了复合磷酸酯酶的活性，适合工业化生产。

具体实施方法

实施例1

在1000L提取罐中，加入500kg水和100kg大麦根须，浸泡7h。浸泡结束后，分批离心，每批保持1200～1500转/分钟离心30min，合并液体得到离心液410L。将离心液转入醇沉釜，控制温度在20℃以下，加入1230L浓度为85％酒精。1.5h后，开始离心，保持离心机12000转/分离心2小时，检测离心液温度控制在不超过20℃。离心完毕，得到复合磷酸酯酶湿酶块9.1kg，湿品以50kg水溶解(分散)，过80目筛出去不溶物，滤液开始喷雾干燥。控制喷雾干燥机进风口温度约150℃，出风口温度约90℃。约2h干燥完毕，得粉末状固体3.5kg，取样检测，酶活性6300u/mg，水分7.2％。

实施例2