[发明专利]用于血型检测的微管、一体式ABO/RhD血型定型检测卡及制备有效
| 申请号: | 201510601037.4 | 申请日: | 2015-09-18 |
| 公开(公告)号: | CN105223366B | 公开(公告)日: | 2017-01-18 |
| 发明(设计)人: | 钟志荣;周翔;吴庆军 | 申请(专利权)人: | 深圳市达科为生物工程有限公司 |
| 主分类号: | G01N33/80 | 分类号: | G01N33/80 |
| 代理公司: | 深圳新创友知识产权代理有限公司44223 | 代理人: | 刘莉 |
| 地址: | 518000 广东省深圳市*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 用于 血型 检测 微管 体式 abo rhd 定型 制备 | ||
技术领域
本发明涉及血型检测,特别是涉及一种用于血型检测的微管、一体式ABO/RhD血型定型检测卡及制备方法。
背景技术
自发现ABO血型以来,ABO血型在临床中应用广泛,ABO血型的准确定型非常重要,是安全输血的基础和保障。Rh血型系统是仅次于ABO血型系统的重要血型系统,也是红细胞血型系统中最为复杂的一个系统,Rh血型系统中的抗原包括D、C、E等,其中D抗原抗原性最强。红细胞表面含有D抗原为RhD阳性,不含有D抗原为RhD阴性,RhD阴性患者接受RhD阳性血液后,至少有20%患者会对D抗原产生免疫应答,在第二次体内接触该抗原后会发生溶血反应,因此对RhD进行定型也十分重要。
目前的ABO/RhD血型定型检测卡需要添加稀释后的红细胞才能进行检测,操作步骤繁琐,效率低下。
发明内容
为了弥补上述现有技术的不足,本发明提出一种用于血型检测的微管、一体式ABO/RhD血型定型检测卡及制备方法。
本发明的技术问题通过以下的技术方案予以解决:
本发明提供的一种用于血型检测的微管为:所述微管从底部往上依次包含凝胶、抗体工作液和血清分离胶;所述抗体工作液中含有血型抗体和使所述血型抗体保持活性的抗体稀释液;所述血清分离胶的比重在1.075~1.077之间,在150G~300G的离心力作用下能够发生触变,由固体变成流体;所述抗体稀释液的比重大于血清分离胶且小于红细胞。
本发明提供的一体式ABO/RhD血型定型检测卡为:所述检测卡上具有8个微管,所述8个微管分别是:
第一微管:为所述微管,且所述抗体工作液中含有的血型抗体为抗A单克隆抗体;
第二微管:为所述微管,且所述抗体工作液中含有的血型抗体为抗B单克隆抗体;
第三微管:为所述微管,且所述抗体工作液中含有的血型抗体为抗D单克隆抗体;
第四微管:从所述第四微管的底部往上依次包含凝胶、抗体稀释液和血清分离胶;
第五微管~第八微管:分别重复第一微管~第四微管。
本发明提供的一体式ABO/RhD血型定型检测卡的制备方法,包含如下步骤:
(1)配制抗体稀释液,所述抗体稀释液的比重大于血清分离胶且小于红细胞;
(2)凝胶溶胀:采用生理盐水或者所述抗体稀释液对凝胶进行溶胀;
(3)配制抗体工作液:分别将抗A单克隆抗体、抗B单克隆抗体和抗D单克隆抗体按每1体积份的抗体加入7体积份的所述抗体稀释液比例配制成所述抗体工作液;
(4)配制特异性凝胶:按照每1g所述已溶胀的凝胶加入1.2-1.7ml所述抗体工作液的比例分别配制成具有IgM性质的抗单克隆抗A凝胶、具有IgM性质的抗单克隆抗B凝胶和具有IgM性质的抗单克隆抗D凝胶;以及配制中性胶:按照每1g所述已溶胀的凝胶加入1.2-1.7ml所述抗体稀释液的比例配制成中性胶;其中:抗A单克隆抗体效价≥128,抗B单克隆抗体效价≥128,抗D单克隆抗体效价≥128;
(5)分装:按照每管45-55μl的灌装量,将所述抗单克隆抗A凝胶、抗单克隆抗B凝胶、抗单克隆抗D凝胶、中性胶分别加入到第一微管、第二微管、第三微管和第四微管中,第五微管~第八微管分别重复第一微管~第四微管;
(6)配制血清分离胶,所述血清分离胶的比重在1.075~1.077之间,在150G~2000G的离心力作用下能够发生触变,由固体变成流体;
(7)分别在第一微管~第八微管中加入0.8g-2g的所述血清分离胶,150G-300G离心一定时间,使所述血清分离胶发生触变由固体变成流体后捕捉在所述抗体工作液的界面上;
(8)封口、贴签以及封装。
本发明与现有技术对比的有益效果是:本发明的一体式ABO/RhD血型定型检测卡可以直接添加外周全血进行检测,而不需要对外周全血进行离心取出红细胞进行稀释后再进行检测,在保证血型检测卡的灵敏度和特异性的前提下,可以减少传统的ABO/RhD血型定型检测卡的操作步骤,提高效率。具体的,本发明采用的血清分离胶比重大于血清小于红细胞,比重在1.075-1.077之间,在一定的离心力条件下能够发生触变由固体变成流体,血型分离胶良好的触变性是延长红细胞与血型抗体发生凝集反应的必要条件,血清分离胶的触变性要满足红细胞停留在抗体工作液中的时间充足,以免红细胞不能与血型抗体反应就已经沉于管底,造成假阴性的检测结果。
附图说明
图1是本发明具体实施方式中的用于血型检测的微管的示意图。
具体实施方式
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