[发明专利]一种厚朴酚与和厚朴酚的快速检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种基于快速热解-气相色谱-质谱联用技术(PY-GC/MS法)快速检测厚朴酚与和厚朴酚含量的方法。

背景技术

1930年日本学者杉井首先从厚朴树的树皮中分离得到了厚朴酚。1973年日本学者藤田分离得到厚朴酚与其异构体和厚朴酚。厚朴酚与和厚朴酚是我国传统中药厚朴的两个主要活性成分，具有抗茵、抗炎、抗肿瘤、肌肉松弛、降胆周醇和抗衰老等多种药理作用。随着研究的深入，也发现了两者的不同的生理活性，如在抗氧化作用方面，厚朴酚比和厚朴酚弱；在肌肉松弛方面，和厚朴酚抑制肌肉收缩作用比厚朴酚缓慢；在防止谷氨酸，天门冬氨酸诱导的线粒体功能障碍方面，和厚朴酚比厚朴酚更有效。因此，针对中药厚朴建立厚朴酚与和厚朴酚的含量分析方法对中药的现代化应用有着积极的意义。

针对厚朴酚与和厚朴酚的分离和分析方法，国内外也做了很多研究，发明和改进了很多方法，如分子识别法、机械化学法、逆流色谱分离法等。在众多的方法中高效液相色谱法是主要和重要的分析方法，该方法配合PDA检测器可以比较灵敏和快速的给出厚朴酚与和厚朴酚的相对含量；受分析仪器的限制，该方法需要对样品进行较为复杂的前处理，通过萃取等方法将厚朴酚与和厚朴酚从药材或其复方制剂中分离，随后采用HPLC/UPLC/SFCLC等液相色谱方法分析。该分析方法的样品处理过程复杂、总体分析时间长。

快速热解-气相色谱/质谱联用技术(PY-GC/MS)是一种高效的检测易挥发性成分的技术，近年来发展迅速。低温下的热解过程是一种非常有效的热分离手段，通过控制热解的温度和时间可以实现低沸点的复杂混合物的初步的气-液或气-固相分离；为气相色谱提供一种在线的和实时的样品前处理和初步分离能力。分析检测过程中的热解时间、温度、升温速率、载气流速、分流比、离子化温度等对分析结果的影响是很大的。因此，基于PY-GC/MS技术的特点，目前亟需提出一种针对厚朴酚与和厚朴酚的快速、微量检测方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种厚朴酚与和厚朴酚的快速检测方法，并基于此，初步判断厚朴等中药材及其制剂质量的高低。

为达到上述目的，本发明采用了以下技术方案：

1)准确称取厚朴或其复方制剂0.01～5.00mg得样品，将样品加入热解杯中；

2)采用快速热解-气相色谱-质谱联用仪对加入热解杯中的样品进行测定；

3)经过步骤2)后，根据测定的原始色谱数据及质谱数据，定性样品中厚朴酚与和厚朴酚的色谱峰，并获得样品中厚朴酚与和厚朴酚的相对含量。

所述样品为块状或粉末状固体。

所述热解的条件为：热解温度为180～300℃，热解时间为0.1～2min。

所述气相色谱的工作条件为：载气为流速0.1～4.0mL/min的氦气，分流比为0～500：1，升温程序为：初始温度为40～70℃，并保持0～3min，然后以≤20℃/min升至300℃。

所述质谱的工作条件为：采用EI源、正离子检测，电子能量为50～85eV，离子源温度为215～290℃，单四级杆温度为145～185℃，扫描方式为全扫描方式，电子倍增器电压为1075～2980V，溶剂延迟为0～6min。

所述相对含量采用面积归一化方法进行计算。

所述厚朴酚与和厚朴酚的色谱峰的定性采用NIST08软件自动匹配计算。

本发明的有益效果体现在：

1)分析效率高。现有方法是将厚朴或其制剂通过萃取方法初步分离得到厚朴酚与和厚朴酚溶液，过滤处理后，利用液相色谱分析，或薄层层析-光谱联用技术(TLC-SP)等检测其有效成分；该方法的一般分析时间为8～12小时。本发明中通过热分离方法直接对厚朴或其制剂的低沸点物质进行初步分离，随后采用气相色谱进一步分离厚朴酚与和厚朴酚，大大节省了分析时间，常规分析时间为0.1～0.3小时，提高了分析效率。

2)所需样品量少，灵敏度好。HPLC检测方法受到仪器的限制，一般需要先分离得到粗品溶液，因此需要的样品量较大，通常是几克到几十克不等；本发明方法的分析所用样品量一般为0.01～1mg，极大的提高了分析灵敏度。

3)本发明优化了热解、色谱、质谱等检测条件，可以快速定性所需的色谱峰，实现了快速和准确检测。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步说明。