[发明专利]六甲氧基二氢黄酮-鼠李糖基-鼠李糖苷及其应用

说明书

技术领域

本发明属医药技术领域，具体涉及一种六甲氧基二氢黄酮-鼠李糖基-鼠李糖苷及其应用。

背景技术

肿瘤的转移是一个多步骤和多因素参与的特别复杂的过程，这个全过程会受到多种因素的影响，比如：肿瘤本身和宿主环境等。转移是癌症中最可怕的一面，它是指细胞从原发性肿瘤扩散到远处器官，并且不间断地持续增长。目前，尽管在诊断、外科技术、病人护理和局部与全身辅助治疗方面已有显著改善，但是病人常常由于癌症转移而导致死亡。原发性肿瘤手术后的“亚健康人”体内残留的循环肿瘤细胞（Circulatingtumorcells,CTCs）是未来肿瘤转移的致命根源。

原发性肿瘤多为器官局部性疾病，但许多病人在手术后，其体内的CTCs会通过血流传播到其它组织器官形成转移，这是导致肿瘤患者死亡的主要原因。CTCs可在如骨髓、淋巴系统等循环系统中长期以休眠或低活性状态存在。由于其休眠（或低活性），所以化疗药物对其不敏感；也由于其在手术后的亚健康人体内含量非常低，因此化疗药物对其都不起作用。与正常血液细胞相比，CTCs具有抗原特性，因为它的表面存在丰富的生物标记物，如SialyLewis、上皮细胞粘附分子（EpCAM）、兔抗人增殖细胞核核抗原单克隆抗体（Ki-67）、人类表皮生长因子受体（HER2）、CD44+和叶酸受体（FolateReceptor）等，这些物质在正常细胞表面不表达或低表达，但是它们在肿瘤细胞表面可以高度表达。

外科手术可以切除早期肿瘤，成功率可以达到95%以上。但是如果一旦肿瘤转移发生了，外科手术就没有办法一一切除全身的转移的肿瘤，这时使用“抗癌药”一样无效；化疗药物不能预防肿瘤转移。尽管“抗癌药”已经显示出了一些作用，但是仍然没有显著性的降低癌症的死亡率，因为手术后病人体内循环肿瘤细胞的数量急剧减少且绝大多数处于静止状态，而化疗药物只对迅速增长和分裂的肿瘤细胞起作用，反而使用化疗药物却严重地打击了病人自身的免疫系统，使得病人自身的平衡沿着不利方面倾斜。因此，我们认为，如果能够药物干预CTCs对内皮细胞的粘附这一重要的肿瘤转移的源头步骤，甚至综合控制几个关键位点，就有可能有效地预防与CTCs有关的肿瘤手术后的再转移。因此术后预防肿瘤转移的低毒药物的开发成为亟需解决的任务。

九里香(Murrayaexotica(L.))为芸香科九里香属植物。与大多数天然植物一样，九里香中的化学成分也很复杂，以黄酮类、香豆素类和生物碱类等为主。

其中黄酮类化合物已经被大量实验证明有抗多种肿瘤转移的活性，包括甲状腺、结肠、口腔、宫颈，肺和肝脏等癌症。例如：槲皮黄酮可以抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231的迁移和侵袭。南方医科大学黎春华等研究发现芹菜素可以抑制结直肠癌的生长与转移。肝细胞生长因子（HGF）和它的受体c-Met的激活在各种各样的肿瘤细胞的癌症的侵袭和转移中都起着重要作用，在对肝癌HepG2的研究中通过细胞粘附和Transwell迁移侵袭试验发现川陈皮素可以显著地抑制由HGF诱导的粘附、侵袭和迁移的能力。

在进行了一系列相关研究后，我们发现了一种有效的可能具有抗肿瘤转移的九里香黄酮糖苷单一化合物的提取、分离方法，并据此完成了本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供化合物六甲氧基二氢黄酮-鼠李糖基-鼠李糖苷及其应用。

六甲氧基二氢黄酮-鼠李糖基-鼠李糖苷，其结构式为：

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所述六甲氧基二氢黄酮-鼠李糖基-鼠李糖苷制备方法包括以下步骤：

(1)取干燥的九里香药材（嫩枝）4.2Kg粉碎，5L75%的乙醇中回流提取3次，每次3小时。过滤，合并滤液；

(2)将（1）中得到的滤液减压浓缩，得到糖浆状总浸膏。总浸膏用水超声悬浮，悬浮液用二氯甲烷萃取，萃取体积比例为1:1，萃取4次，减压浓缩溶剂部分得九里香粗提物；

（3）粗提取物于硅胶柱上以乙酸乙酯-石油醚进行梯度层析分离，收集乙酸乙酯洗脱部分，旋转蒸发除去溶剂，得到九里香黄酮组分，其收率为0.05-0.1%；

（4）采用半制备高效液相色谱将（3）中组分进行分离，得到九里香黄酮糖苷单体提取物；经鉴别，结构为：六甲氧基二氢黄酮-鼠李糖基-鼠李糖苷。

步骤（4）中的制备液相分离条件为，色谱柱：AgelaVenusilXBPC18；流速：1-4mL/min；柱温：35°C；检测荧光激发波长352nm、发射波长458nm；流动相为甲醇和纯水混合液，甲醇和纯水的体积比例9:11，等度洗脱。