[发明专利]一种Mn+离子配位沉淀法纯化苹果多酚的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种Mⁿ⁺离子配位沉淀法纯化苹果多酚的方法。

背景技术

苹果多酚(ApplePolyphenols，AP)是一种天然活性多酚，也是一种天然抗氧化剂，属于植物多酚的一种，AP存在于苹果的各个部位中，它不是一种单一的物质，而是苹果内所含有的所有酚类物质的总称。天然活性多酚的纯化方法主要有：溶剂萃取法、树脂吸附法、柱层析法、膜分离技术、高速逆流色谱法等。苹果多酚作为一种天然活性多酚，它的纯化方法也离不开上述几种。研究表明实验室针对于苹果多酚的纯化，大多都先采用不同的方法进行初步提取，然后在得到的苹果多酚粗提液的基础上进行进一步纯化，例如首先通过超声波提取法初步提取国光苹果中的苹果多酚，然后通过研究AB-8大孔树脂对苹果多酚的吸附特性，找出适合于苹果多酚分离纯化的条件(金莹，2006)。通过四元二次通用旋转设计辅助微波法确定了苹果渣中多酚的最佳提取工艺；针对苹果多酚粗提物，利用大孔吸附树脂SephadexLH-20脂对苹果多酚进行纯化(郭娟，2006)。应用超声波辅助乙醇初提苹果皮渣多酚然后通过选取NKA-9大孔树脂法继续纯化得到纯度为72％苹果皮渣多酚粉末(李珍，2014)。同样通过对大孔树脂静态吸附和解析综合研究，在16种树脂中选择NKA-9大孔树脂来纯化苹果多酚粗提液，近年来脂吸附纯化法慢慢开始走出实验室朝着工业化进行发展(王育红，2007)。此外在其他技术的应用上，利用膜分离技术研究了烟台红富士苹果多酚氧化酶的分离纯化条件(刘芳，2015)。研究了固相萃取法，从四种固相萃取小柱中筛选出分离效果较好的WatersOasisHLB固相萃取小柱对苹果多酚进行纯化(贺金娜，2014)。树脂吸附法及柱层析吸附分离法因材料价格高，材料再生存在一定问题，因此鲜少应用于工业化生产；膜分离技术和高速逆流色谱法等新方法近年仍处于实验室研究阶段，实现工业化尚有一定困难。

发明内容

本发明要解决现有纯化苹果多酚的方法存在成本高、苹果多酚提取率低的问题，而提供了一种Mⁿ⁺离子配位沉淀法纯化苹果多酚的方法。

本发明一种Mⁿ⁺离子配位沉淀法纯化苹果多酚的方法是通过以下步骤进行的：

一、原料预处理：将新鲜的苹果切成1m³～3m³的小块，在温度为70℃～80℃的水中漂烫8s～10s后破碎得到匀浆；

二、微波辅助粗提取：将步骤一得到的匀浆加入到质量浓度为50％的乙醇中，然后在微波功率为640W的条件下进行粗提取，粗提取的时间为70s，得到苹果多酚粗提取液；所述步骤一得到的匀浆的质量与质量浓度为50％的乙醇的体积比为1g:14mL；所述苹果多酚粗提取液中苹果多酚的含量为8.93mg/g～9.92mg/g；

三、将步骤二得到的苹果多酚粗提取液采用质量浓度为1％～5％的氨水将pH值从3.8～4.5调整至5～9，得到调节后的苹果多酚粗提取液；向调节后的苹果多酚粗提取液中投加Mⁿ⁺离子，然后在离心转速为500rpm～4000rpm、离心时间为10min～70min和pH值为5～9的条件下进行离心，静置10min，得到纯化后的苹果多酚沉淀物；所述Mⁿ⁺离子由Mⁿ⁺金属盐提供的；所述Mⁿ⁺金属盐的质量与步骤二得到的苹果多酚粗提取液的体积比为1g:(35～500)mL；

四、沉淀物转溶提取：将步骤三得到的纯化后的苹果多酚沉淀物加入到浓度为1mol/L的盐酸中至沉淀物完全溶解，得到转溶后的苹果多酚样液，然后再向转溶后的苹果多酚样液中加入乙酸乙酯萃取，冷冻干燥得到棕红色粉末状苹果多酚；所述转溶后的苹果多酚样液与乙酸乙酯的体积比为1:1。

本发明的有益效果在于：

本发明采用金属离子纯化粗提液中的苹果多酚，首先环保节能，降低成本；其次，方法安全快捷可操控；更重要的是，该方法得到的苹果多酚沉淀率高，纯化后所得到的苹果多酚色泽棕红，略带果香。苹果多酚沉淀率可达93.98％。

附图说明

图1为不同ZnCl₃添加量与苹果多酚沉淀率的关系曲线；

图2为不同pH值与苹果多酚沉淀率的关系曲线；

图3为不同离心转速与苹果多酚沉淀率的关系曲线；

图4不同离心时间与苹果多酚沉淀率的关系曲线。

具体实施方式