[发明专利]马铃薯脱毒苗液体培养装置及液体培养快繁方法

权利要求书

1.一种马铃薯脱毒苗液体培养快繁方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤一、提供马铃薯脱毒苗液体培养装置、液体培养基及脱毒马铃薯试管苗；

所述马铃薯脱毒苗液体培养装置包括营养池、苗床以及培养瓶；

所述营养池包括池体及保护膜，所述池体一端开口且具收容空间，所述保护膜覆设于所述池体的开口端，所述池体包括进液口、排液口和控制阀，所述进液口和所述排液口分别设于所述池体两端并与其内部连通，所述控制阀分别设于所述进液口和所述排液口；

所述苗床包括床本体及调节所述床本体在所述营养池内上升或下降的升降调节装置，所述床本体包括定植面板和多个均匀间隔排列设置的定植孔，所述定植孔贯穿所述定植面板；

所述培养瓶包括多个气孔和过滤纸，所述气孔贯穿设于所述培养瓶的侧壁和瓶底，所述过滤纸设于所述培养瓶内并铺设于瓶底；

所述液体培养基的配制：以MS培养基为基础培养基，并在1L MS培养基中添加如下组分，并使各组分的终浓度如下：NAA0.05-0.1mg/L、6-BA 1.0-1.5mg/L、蔗糖30-40g/l，并调节pH值至5.6-5.8；

步骤二、将所述脱毒马铃薯试管苗剪切和消毒灭菌处理后进行接种；

具体地，将所述脱毒马铃薯试管苗按芽点剪切为长度为1-3cm的芽段，置于滤纸吸干水分，用HgCl₂、NaClO及70-75％的酒精进行消毒灭菌处理，再用无菌水冲洗4-5次，并用滤纸吸干水分，最后接种至所述培养瓶内的过滤纸上；

步骤三、将步骤一配制好的所述液体培养基通过所述进液口输送至所述池体内，并维持一定高度；

步骤四、将所述培养瓶设于所述苗床的定植孔，并通过所述升降调节装置调整所述苗床的垂直高度，使得所述池体内的液体培养基刚好没过所述培养瓶内的过滤纸；

步骤五、首先采用静置液体培养2-3d至牙段开始生根后，然后再采用液体间歇培养5-10d；

具体地，所述静置液体培养为通过调节所述苗床的高度，使得所述池体内的液体培养基没过所述滤纸上的芽段0.2-0.5mm，并在25±2℃，光照时间12-16h/d，光照强度2000-3000LUX条件下对所述培养瓶内的芽段进行光照培养；

所述液体间歇培养为通过所述升降调节装置间歇式调节所述苗床的高度，使得所述池体内的液体培养基没过所述过滤纸上的芽段0.2-0.5mm，或者处于没有没过所述培养瓶内的过滤纸的状态，间歇式的调节频率为3-5次/天，每次没过滤纸的时间维持在5-10分钟，在自然光条件下进行光照培养。

2.根据权利要求1所述的马铃薯脱毒苗液体培养快繁方法，其特征在于，在步骤一中，所述马铃薯脱毒苗液体培养装置及所述液体培养基在使用前进行真空灭菌15-20min，真空度为0.1-0.15Mpa，灭菌的温度为121℃-128℃。

3.根据权利要求1所述的马铃薯脱毒苗液体培养快繁方法，其特征在于，在步骤五中，还包括定期对所述液体培养基进行成份检测。